基于TGF-β_(1)/Smads信号通路探讨水蛭素治疗痛风性关节炎的机制研究

目的:探讨水蛭素治疗单钠尿酸盐(MSU)所致痛风性关节炎的作用机制。方法:用250μg/mL MSU诱导RA-HFLs细胞炎症模型,将细胞分为正常对照组、模型组、秋水仙碱(1μmol/L)组及水蛭素低(1 U/mL)、中(2 U/mL)、高(4 U/mL)浓度组。CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;ELISA检测各组细胞上清中炎症因子水平;Real-time PCR检测各组细胞中纤维化相关基因表达;Western Blot检测各组细胞中TGF-β_(1)/Smads信号通路相关蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组RA-HLFs细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、NF-κB水平显著升高,细胞活力显著降低,α-SMA、Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA及TGF-β_(1)蛋白表达和p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3水平显著升高(P<0.01或P<0.001)。与模型组比较,水蛭素各浓度组RA-HFLs细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、NF-κB水平显著降低,细胞活力显著升高,α-SMA、Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA及TGF-β_(1)蛋白表达和p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3水平显著降低(P<0.05~P<0.001)。水蛭素的作用呈浓度依赖性。结论:水蛭素能促进RA-HFLs细胞增殖,抑制细胞凋亡、炎症反应和纤维化,其作用机制可能与调节TGF-β_(1)/Smads信号通路有关。