基于自噬探究补肺活血胶囊对博来霉素诱发小鼠肺纤维化的抑制作用

目的 基于自噬与上皮间质转化(EMT)角度探究补肺活血胶囊对肺纤维化(PF)小鼠的作用。方法 105只C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,雷帕霉素组(2 mg/kg,腹腔注射),低、中、高剂量补肺活血组(0.32、0.63、1.62 g/kg补肺活血胶囊,灌胃)和补肺活血+3-MA组(1.62 g/kg补肺活血胶囊,灌胃;30 mg/kg 3-MA,腹腔注射)。通过对小鼠气管内单次注射2.5 mg/kg博来霉素(BLM)来诱导PF,造模成功后1 d开始给药,持续21 d。统计小鼠存活率与体质量,采集肺泡灌洗液(BALF)并测定总细胞与总蛋白,测定肺组织湿干重比与羟脯氨酸水平,苏木精和伊红(HE)染色和Masson三色染色观察肺组织病理学变化,RT-qPCR法检测肺组织EMT相关因子(E-cad、Vim、α-SMA、TGF-β1)mRNA表达,Western blot法检测肺组织EMT相关蛋白以及自噬相关蛋白(p-mTOR、mTOR、P62、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin1)表达。结果 与模型组比较,雷帕霉素与补肺活血胶囊干预后PF小鼠生存率提高,体质量增加,肺组织湿干重比、BALF总细胞和总蛋白、羟脯氨酸水平均降低,肺组织病理形态改善,肺组织上皮细胞标志物E-cad mRNA及蛋白表达升高,间质细胞标志物Vim、α-SMA、TGF-β1 mRNA和蛋白表达降低,p-mTOR/mTOR、P62蛋白表达降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1蛋白表达升高;3-MA干预后PF小鼠各指标与模型组无明显差异。结论 补肺活血胶囊可通过促进上皮细胞自噬并抑制EMT来缓解BLM诱导的PF小鼠肺损伤。