竹根七总皂苷的提取纯化工艺及抗炎活性研究

目的对提取与纯化竹根七中总皂苷的工艺条件进行优化与提升,初步探索验证其抗炎活性。方法以总皂苷含量为评价指标,采用正交实验设计,通过回流提取法考察提取温度、时间、溶剂浓度及料液比对总皂苷含量的影响,进行统计分析;利用大孔树脂的吸附纯化作用,探究吸附和解吸附过程中不同条件对总皂苷纯度的影响,分析得出最佳纯化工艺;以RAW264.7细胞上清IL-1β、IL-6、TNF-α水平为指标,通过CCK-8法筛选最佳给药浓度及ELISA试剂盒检测细胞上清炎症因子水平,考察竹根七总皂苷抗炎活性。结果最优回流提取工艺为乙醇浓度70%,料液比1∶40,温度80℃,提取时间30 min,竹根七总皂苷最终得率为9.74%;在最优提取方法下,探究竹根七皂苷纯化富集工艺,选用D101大孔树脂,当上样量为1 BV,吸附时间12 h,洗脱剂为50%乙醇-水,洗脱体积5 BV时,纯化后总皂苷纯度达到70%以上,由此得出其最佳纯化工艺;纯化后的总皂苷对RAW264.7细胞炎症具有抑制作用,其最低质量浓度为8μg·mL^(-1)。结论本实验所得工艺能较好的富集竹根七总皂苷,该方法简单易行稳定可靠;所得竹根七皂苷具有较好的抗炎活性。