基于PI3K/AKT/mTORC1信号通路探讨三七对阿霉素肾纤维化大鼠自噬水平的影响

目的基于PI3K/AKT/mTORC1信号通路,通过实验观察三七对阿霉素肾纤维化大鼠自噬水平的影响。方法选用健康雄性清洁级SD(Sprasue-Dawley)大鼠60只,随机分成正常组、模型组、三七低剂量治疗组、三七中剂量治疗组、三七高剂量治疗组和贝那普利组共6组,每组10只。除正常组大鼠以外,各组大鼠均采用阿霉素诱导建立肾纤维化大鼠模型。造模成功后,对正常组、模型组均予以生理盐水[10mL/(kg·d)]灌胃;三七低、中、高剂量治疗组分别予以三七颗粒0.45g/(kg·d)、0.9g/(kg·d)、1.8g/(kg·d)水溶液灌胃,贝那普利组予以盐酸贝那普利5mg/(kg·d)药液灌胃,每天一次,共干预8周。分别采用HE、Masson染色方法观察肾脏组织病理情况;采用蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)法检测肾组织中PI3K、AKT、mTORC1、P62、Beclin1、LC3的蛋白表达水平。结果(1)与正常组相比,模型组肾组织可见空泡样、纤维样改变,肾小球萎缩,肾小管囊性扩张,大量炎性细胞的浸润,而三七各个剂量组与贝那普利组肾组织的上述病理改变均有不同程度的改善,且三七中、高剂量组和贝那普利组肾组织病变改善最为明显。(2)与正常组相比,模型组的PI3K、AKT、mTORC1、P62蛋白表达量明显增加(P<0.05);与模型组相比较,三七各个剂量组与贝那普利组PI3K、AKT、mTORC1、P62的表达量均有不同程度减少,其中,三七中、高剂量组与贝那普利组PI3K、AKT、mTORC1、P62的表达量明显减少(P<0.05)。(3)与正常组相比,模型组的Beclin1、LC3蛋白表达量明显减少(P<0.05);与模型组相比较,三七各个剂量组Beclin1、LC3的表达量随着三七剂量的增加均有不同程度增加,其中,三七中、高剂量组Beclin1、LC3的表达量和贝那普利组LC3的表达量明显增加(P<0.05)。结论三七可能通过抑制PI3K/AKT/mTORC1信号通路的活化,进而上调肾组织自噬水平,从而发挥抗肾纤维化的作用。