乙酸纤维素薄膜电泳不同点样法的实验条件优化

Optimization of Experimental Conditions for Different Spotting Methods in Cellulose Acetate Thin Film Electrophoresis

针对目前“乙酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白”实验教学中存在的问题,本试验以牛血清为材料,通过比较不同点样法、缓冲液、电压和电泳时间,以期得到便于操作、清晰可辨图谱的操作条件。结果表明:毛细管和钢笔点样的图谱虽然优于盖玻片,但操作不方便;在硼酸盐缓冲液中电泳,图谱最清晰且重复利用次数多;低压(90 V)时蛋白条带分不开,而高压(160 V)电泳时条带发生弥散影响也会电泳分辨率;适宜电压条件下,需电泳80 min以上才可将牛血清中各条蛋白条带分离开来。因而认为乙酸纤维薄膜电泳法分离牛血清白蛋白的最佳和最方便操作条件为:以盖玻片进行点样,在硼酸缓冲液中稳压120 V电泳100 min。