基于Nrf2/HO-1通路探讨虎杖含药血清对血管内皮细胞铁死亡的干预作用

目的:探讨虎杖含药血清调节Nrf2/HO-1信号通路对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)所诱导血管内皮细胞铁死亡的影响。方法:采用120μg/mL的ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)建立泡沫细胞模型,分为模型组、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1组及虎杖低、高剂量含药血清组,另设空白血清对照组。药物干预24 h后,通过油红O染色观察内皮细胞泡沫化程度;CCK-8法检测细胞增殖率;透射电镜观察细胞线粒体形态;试剂盒检测细胞SOD、MDA、GSH、Fe^(2+)水平;免疫荧光法检测ROS水平;流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞内脂质ROS水平;Western Blot测定细胞Nrf2、HO-1、GPX4蛋白表达。结果:油红O染色显示,经ox-LDL诱导后,模型组细胞内可见大量红色脂滴,呈现出典型泡沫细胞形态,提示泡沫细胞模型制备成功。透射电镜下可见模型组线粒体形态变小,虎杖高剂量含药血清组能明显阻止线粒体固缩;与模型组比较,虎杖高剂量含药血清组及Ferrostatin-1组细胞SOD、GSH水平及Nrf2、HO-1、GPX4蛋白表达显著升高,MDA水平、泡沫细胞凋亡率及细胞内ROS和脂质ROS水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:虎杖含药血清能降低ox-LDL诱导的HUVECs氧化应激水平,从而抑制铁死亡,其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。