基于转录组学研究鳖血柴胡治疗肝阴虚证的作用机制

Study on the Mechanism of Bupleuri Radix processed with Trionyx blood in Treating Liver Yin Deficiency Syndrome Based on Transcriptomics

目的:研究鳖血柴胡对肝阴虚证的治疗作用及机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、柴胡组、鳖甲-柴胡组、鳖血柴胡组,每组6只。采用腹腔注射CCl4联合灌胃温热中药的方法建立肝阴虚证模型。通过检测肝功能指标、阴虚指标及炎症因子指标,观察肝脏HE染色切片,评价鳖血柴胡对肝阴虚证的治疗作用。并通过转录组测序技术探究鳖血柴胡治疗肝阴虚证的作用机制,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证转录组测序结果的准确性。结果:与模型组比较,柴胡组、鳖甲-柴胡组及鳖血柴胡组均可显著降低血清中肝功能指标天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)水平(P<0.01);降低环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸腺苷与环磷酸鸟苷比值(cAMP/cGMP)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)水平(P<0.01);降低促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)表达,促进抗炎细胞因子白细胞介素-10(IL-10)表达(P<0.01)。转录组测序结果显示,鳖血柴胡通过调控687个基因起到治疗肝阴虚证的作用。KEGG通路富集结果显示,差异基因显著富集在补体与凝血级联反应通路,PPI分析得到的10个hub基因中,有5个都显著富集于此通路。结论:柴胡经鳖血炮制后劫肝阴之性减弱,可用于肝阴虚证的治疗。其机制是通过调控补体与凝血反应通路,调节免疫反应与炎症反应,进而起到治疗肝阴虚证的作用。