加味小青龙汤影响Treg/Th17细胞失衡改善小鼠哮喘的机制研究

目的研究加味小青龙汤对实验性哮喘小鼠Treg/Th17细胞失衡的影响,探讨其改善哮喘的疗效和机制。方法将Balb/c小鼠随机分为4组:对照组、模型组、小青龙汤组、加味小青龙汤组。除对照组,其余组采用卵清蛋白(OVA)致敏、激发制备小鼠哮喘模型,小青龙汤和加味小青龙汤组分别灌胃小青龙汤和加味小青龙进行治疗。末次致敏24 h后,HE染色观察肺组织炎性细胞浸润,PAS染色观察支气管杯状细胞增生,ELISA法检测血清IgE和BALF中IL-6、IL-17A、IL-10水平变化,Giemsa染色统计支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞种类,流式细胞术分析脾组织中CD4+ROR-γt+和CD4+Foxp3+细胞百分比。Real-time PCR检测肺组织中ROR-γt、FoxP3 mRNA的表达,Western blot检测肺组织中RORγt、FoxP3、HO-1及胞核Nrf2蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组小鼠肺组织炎症评分、支气管细胞增生及BALF中炎性细胞计数显著增加;与模型组比较,加味小青龙汤可以改善上述变化,且优于小青龙汤组。与对照组比较,模型组血清IgE、BALF中IL-6、IL-17A水平及脾脏Th17细胞比例显著升高,IL-10水平及脾脏Treg细胞比例显著降低,与模型组比较,加味小青龙汤组IgE及IL-6、IL-17A水平显著降低,Th17细胞比例减少,IL-10水平显著升高,Treg细胞比例增加,且优于小青龙汤组。与对照组比较,模型组ROR-γt的表达显著增加,FoxP3、HO-1及胞核Nrf2的表达显著减少;与模型组比较,加味小青龙汤组ROR-γt的表达显著减少,FoxP3、HO-1及胞核Nrf2的表达显著增加,且优于小青龙汤组。结论加味小青龙汤通过激活Nrf2/HO-1信号,影响FoxP3、ROR-γt的表达,从而调节Treg/Th17细胞平衡起到减轻气道炎症,治疗哮喘的作用。