改良耻垢分枝杆菌抗酸染色法在实验教学中的应用

目的探索耻垢分枝杆菌抗酸染色操作的最佳条件,使其满足医学微生物实验教学需要。方法添加吐温-80至培养基中,将耻垢分枝杆菌培养48 h后制备成菌悬液,与金黄色葡萄球菌混匀后制成抗酸染色标本。在不同麦氏浊度及盐酸酒精浓度下,用石炭酸复红浸染10 min,酒精脱色30 s,亚甲基蓝复染30 s,筛选出最佳条件组合的染色结果,并与结核分枝杆菌染色对比分析。同时,连续染色一周,测试样本稳定性。结果吐温-80显著分散了耻垢分枝杆菌菌体,使其菌悬液颗粒细小,匀质性高,由此制备的抗酸染色标本在3.0 MCF浊度、1%酸性酒精浓度条件下,镜下蓝色背景清晰,对比度明显,抗酸杆菌排列均匀,形态典型,容易观察。制备好的标本4℃下存放一周,未发现明显的颜色及形态改变。结论优化后的耻垢分枝杆菌抗酸染色操作具有简单、快速,染色特异性好、稳定性高等优点,值得进一步推广。