黄连解毒汤对星形胶质细胞ODC1的影响及其在APP/PS1小鼠学习记忆中的潜在作用

目的:探究黄连解毒汤对APP/PS1小鼠海马星形胶质细胞中与尿素代谢有关基因ODC1表达的影响及对小鼠行为学的改善作用和神经保护作用。方法:以8月龄的雄性APP/PS1双转基因小鼠为研究对象,随机分为模型组、黄连解毒汤组(990.45mg/kg)、多奈哌齐组(1.52mg/kg),对照组为8月龄雄性C57BL/6J小鼠,每组12只。对照组和模型组予以生理盐水灌胃,其余各组以相应剂量多奈哌齐或黄连解毒汤灌胃。给药一个月后,采用Morris水迷宫检测黄连解毒汤对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响;苏木素-伊红染色(HE)观察小鼠海马CA3区神经元病理改变;免疫组化法(IHC)观察小鼠海马组织GABA、GFAP、Aβ蛋白表达;实时荧光定量PCR反应(Real-time PCR)检测小鼠海马组织中ODC1基因的表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测检测小鼠血清GABA、GFAP水平;脲酶法检测小鼠海马尿素氮(BUN)含量。结果:与对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越平台次数、目标象限停留时间百分比与目标象限移动距离均减少(P<0.05),HE染色可见较多的神经元固缩,细胞排列不规则,嗜碱性增强,胞质与胞核分界不清晰,ODC1表达倍数、血清GFAP、GABA及海马BUN含量均增加(P<0.05);与模型组比较,黄连解毒汤组和多奈哌齐组小鼠在穿越平台的次数、目标象限的停留时间百分比及移动距离均增加(P<0.05),神经元在形态上更为饱满,细胞之间的排列整齐有序,ODC1表达倍数、GFAP、GABA及BUN含量均下降(P<0.05);与多奈哌齐组比较,黄连解毒汤组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),而穿越平台的次数、在目标象限的停留时间百分比及移动距离方面并无明显变化(P>0.05),GFAP含量高于多奈哌齐组(P>0.05),ODC1表达、GABA与BUN含量无明显差异。结论:黄连解毒汤增强了APP/PS1小鼠的学习和记忆功能,为神经元提供了保护,并有效抑制了APP/PS1小鼠星形胶质细胞的过度活化和有毒副产物GABA的产生。这一作用可能与其在星形胶质细胞中抑制了与尿素代谢相关的ODC1基因表达有关。