左归降糖清肝方对MKR鼠2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝损伤的影响

目的探讨左归降糖清肝方对2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病MKR鼠肝组织FOXO1、FASL表达的影响,进一步证实左归降糖清肝方治疗糖尿病非酒精性脂肪肝病变的科学依据。方法选取8周龄高脂饲养的MKR小鼠40只,雌雄各半,随机分为模型组(Model组)、左归降糖清肝方低剂量组(ZGJTQGF-L组:左归降糖清肝方7.4 g·kg^(-1))、左归降糖清肝方高剂量组(ZGJTQGF-H组:左归降糖清肝方14.8 g·kg^(-1))、二甲双胍组(Met组:二甲双胍67×10^(-3)g·kg^(-1)),每组10只,另设10只FVB小鼠作为正常组(Control组),予普通饲料喂养。药物干预治疗28 d后,检测空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),HE染色及电镜观察肝组织形态结构及病理变化,Western Blot检测肝组织FOXO1、FASL的蛋白表达水平,PCR定量检测肝组织FASL、FOXO1的mRNA表达含量。结果与正常组比较,模型组FBG、ALT、AST、TG、TC显著升高;与正常组比较,模型组FASL、FOXO1蛋白表达量显著升高,FASL mRNA表达量显著升高(P<0.05);与模型组比较,中药组与西药组血糖显著降低(P<0.05);中药组与西药组之间差异无统计学意义(P>0.05),中药组与西药组ALT、AST显著降低(P<0.05);中药组高、低剂量之间差异无统计学意义(P>0.05),中药组与西药组TG、TC显著降低(P<0.05),中药组与西药组FASL、FOXO1蛋白表达量显著降低(P<0.01),中药组与西药组FASL、FOXO1的mRNA表达量显著降低(P<0.01),中药组与西药组之间FOXO1 mRNA表达量差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果:与正常组比较,模型组肝细胞弥漫性脂肪变性,肝组织纤维化变化;与模型组比较,中药组与西药组均未出现明显的脂肪空泡现象,肿胀和纤维化的程度降低。电镜结果:与正常组比较,模型组肝细胞内积有很多脂肪,溶酶体被大量的脂肪颗粒包围;与模型组比较,西药组及中药组溶酶体外围均有少量或无脂肪颗粒,脂肪堆积显著减少。结论左归降糖清肝方通过下调FOXO1蛋白,降低FASL的蛋白表达,肝细胞凋亡率减少,延缓肝损伤,从而起到保护肝脏,治疗T2DM合并NAFLD的作用。