基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨清宫汤对广泛性焦虑症大鼠神经炎症的影响

目的探讨清宫汤通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对广泛性焦虑症(GAD)大鼠焦虑样行为的影响。方法将48只大鼠随机分为对照组、模型组、劳拉西泮组(0.09 mg/kg)和清宫汤高、中、低剂量组(20.34、10.17、5.09 g/kg)。除对照组外,其他各组大鼠均采用不确定空瓶刺激和慢性束缚应激的方法制备GAD模型。造模成功后,各组给予相应剂量药物干预14 d。通过高架十字迷宫实验(EPM)、旷场实验(OFT)和明暗箱实验(LDB)检测各组大鼠的焦虑样行为,ELISA法检测大鼠血清和海马组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平,RT-qPCR法检测海马组织TLR4、MyD88、NF-κB p 65 mRNA表达,Western blot法检测海马组织TLR4、MyD88、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达,免疫荧光法检测NF-κB p65入核情况。结果与对照组比较,模型组大鼠在EPM、OFT、LDB中的探索行为学指标降低(P<0.05,P<0.01),血清和海马组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高(P<0.01),海马组织TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01),p-NF-κB p65蛋白表达升高(P<0.01),海马组织NF-κB p65入核增多;与模型组比较,清宫汤高剂量组行为学指标升高(P<0.01),清宫汤高、中剂量组血清和海马组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(P<0.05,P<0.01),清宫汤各剂量组海马组织TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),p-NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.01),NF-κB p65入核减少。结论清宫汤可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路活化,降低促炎因子水平,进而缓解GAD大鼠的焦虑样行为。