基于TLR4/NF-κB信号通路探讨复方地黄颗粒治疗帕金森病阴虚动风证大鼠的作用机制

目的 基于复方地黄颗粒对右侧黑质中TLR4/NF-κB信号通路的影响,探讨治疗帕金森病阴虚动风证大鼠的可能作用机制。方法 100只SPF级雄性SD大鼠,随机选取20只作为正常对照组和假手术组(n=10),剩余80只采用6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine, 6-OHDA)注射右侧黑质二坐标法制备PD阴虚动风证动物模型,将成模的50只大鼠分为模型组、美多芭组和复方地黄颗粒低、中、高(n=10)。复方地黄颗粒低、中、高组每只大鼠每天复方地黄颗粒灌胃量依次为1.75g/kg、3.5g/kg、7g/kg,美多芭组为150mg/kg多巴丝肼,连续28d、1次/日,正常对照组和假手术组0.9%氯化钠溶液10ml/kg灌胃。在此期间观察各组大鼠情况和神经行为学变化,灌胃结束后脱臼处死大鼠采集右侧黑质。通过RT-qPCR、Western blot及免疫组化法检测TLR4/NF-κB信号通路中TOLL样受体4(TLR4)、核转录因子-kappa B p65(NF-κB p65)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。结果 模型组与正常对照组和假手术组比较,大鼠旋转圈数和右侧黑质TLR4、NF-κB p65、TNF-α、IL-6蛋白、mRNA表达上升,但悬挂时间和移动格数下降(P<0.01)。模型组与美多芭组和不同剂量的复方地黄颗粒组比较,大鼠旋转圈数和大鼠右侧黑质TLR4、NF-κB p65、TNF-α、IL-6蛋白、mRNA表达下降,但悬挂时间和移动格数增加(P<0.05,P<0.01),其中复方地黄颗粒高剂量组差异达到显著程度(P<0.01)。结论 复方地黄颗粒通过调控TLR4/NF-κB信号通路起到减少炎症反应、保护多巴胺(DA)能神经元的作用,其机制可能与调控蛋白表达相关。