基于JAK2/STAT3信号通路探讨补坎益离汤改善GERD大鼠食管线粒体氧化损伤的机制研究

目的 基于JAK2/STAT3信号通路探讨补坎益离汤改善胃食管反流病(Gastroesophageal Reflux Disease, GERD)大鼠食管组织线粒体氧化损伤的作用机制。方法 28只SD大鼠随机选取5只作为假手术组,其余大鼠采用十二指肠吻合术构建GERD大鼠模型,第6周随机选取3只验证模型成功后将造模大鼠按照随机数字表法分为模型组、补坎益离汤低、中、高剂量(8.85、17.7、35.4g·kg^(-1))组,期间观察并记录大鼠一般情况,每组各5只,疗程共5周。光镜下观察大鼠食管病理组织学结构,并进行食管黏膜损伤指数评分;化学发光法检测食管组织ATP水平,免疫荧光检测食管组织ROS水平、Ca^(2+)浓度,免疫组化(IHC)检测食管下段组织中JAK2、STAT3蛋白量,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测JAK2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3蛋白水平。结果 GERD模型大鼠毛发无光泽,略有结节,精神不振,可见食物残渣反流至口角,光镜下观察食管黏膜组织结构紊乱,黏膜上皮增生,固有层乳头延长,可见炎症细胞浸润,黏膜下层可见出血,食管黏膜损伤指数评分增加。经补坎益离汤低、中、高剂量干预后,大鼠毛发及精神改善,食管黏膜结构基本恢复正常,黏膜上皮未见明显增生,黏膜下层少量出血,食管黏膜损伤指数评分降低。与假手术组相比,模型组大鼠食管组织ATP含量显著降低,ROS、Ca^(2+)含量显著上升(P<0.01),JAK2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3相对表达量均显著升高(P<0.01);与模型组相比,补坎益离汤中、高剂量组大鼠食管组织ATP含量显著上升,ROS、Ca^(2+)含量显著下降(P<0.01),JAK2、STAT3、P-STAT3相对表达量均显著下降(P<0.01)。结论 JAK2/STAT3信号通路被激活导致线粒体氧化损伤与GERD发病密切相关;补坎益离汤可以有效修复GERD大鼠食管黏膜组织损伤,其机制可能与补坎益离汤抑制JAK2/STAT3信号通路改善线粒体氧化损伤有关。