浦东鸡囊胚细胞冷冻保存技术的优化

本研究旨在探究不同冷冻-解冻程序对浦东鸡囊胚细胞(blastodermal cells,BCs)冷冻保存效果的影响。以浦东鸡BCs为研究对象,比较了不同冷冻-解冻程序下细胞解冻后培养24 h的活率和贴壁率。经综合分析,鸡BCs最佳的冷冻方法为:以20%二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)+20%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)+60%DMEM (dulbecco′s modified eagle medium)为冷冻保护液,通过应用程序冷冻仪,在4℃条件下以0.7℃/min降温速率,降温至—7℃保持10 min,以1.0℃/min速率降温至—35℃,之后投入液氮保存。最佳的解冻方法为:在37℃水浴锅中解冻30s,培养24h后鸡BCs的质量最佳。本研究优化了浦东鸡BCs冷冻保存技术,为家禽种质资源保存工作提供一定参考。