藿砂口服液对感染后肠易激综合征脾虚夹湿证大鼠的作用

Effect of Huosha Oral Liquid on Rats With Spleen Deficiency and Dampness Accumulation Syndrome of Irritable Bowel Syndrome after Infection

目的 探讨藿砂口服液对感染后肠易激综合征(PI-IBS)脾虚夹湿证大鼠的作用。方法 将45只SPF级Wistar雄性大鼠采用随机数字表法分为对照组10只、模型组10只和病证组25只,实验第1天模型组采用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠1次建立PI-IBS模型,病证组在模型组基础上置于高湿环境以建立脾虚夹湿证PI-IBS模型,对照组不做任何处理,3组均采用12 h昼夜交替照明,水料自由饮用,持续28 d。实验第29天进行模型评价,并采用随机数字表法从3组中各抽选5只大鼠观察结肠组织病理形态。与正常组比较,模型组大鼠出现体质量下降,24 h进食量减少,粪便含水率、内脏疼痛评分升高,糖水偏好率下降,结肠组织苏木精-伊红(HE)染色显示出现炎症细胞浸润,提示PI-IBS造模成功;与模型组比较,病证组大鼠出现神态萎靡、毛发枯槁、蜷缩聚堆,进食量减少,体质量下降,提示脾虚夹湿证PI-IBS造模成功。造模成功后将病证组20只采用随机数字表法分成阴性组及藿砂口服液低、中、高剂量组各5只,低、中、高剂量组分别按照体质量予1.35、2.7、5.4 mL/kg藿砂口服液2.0 mL灌胃,对照组、模型组和阴性组均予生理盐水2.0 mL灌胃,6组均为1次/d,干预14 d。实验第42天给药后比较6组大鼠一般状态、24 h进食量、体质量、粪便含水率、内脏疼痛评分和糖水偏好率,HE染色观察结肠组织病理形态,ELISA检测结肠组织中白介素-17(IL-17)、白介素-21(IL-21)与白介素-22(IL-22)含量,Western blot检测结肠组织中紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)与闭合蛋白(OCLN)表达量。结果 与对照组比较,模型组24 h进食量、体质量、糖水偏好率均降低(P<0.05),粪便含水率、内脏疼痛评分均升高(P<0.05);结肠组织HE染色可见炎症细胞浸润、间质水肿;结肠组织中IL-17、IL-21含量均升高(P<0.05);结肠组织中E-cadherin、OCLN、Claudin-1蛋白表达量均降低(P<0.05)。与模型组比较,阴性组体质量、24 h进食量均降低(P<0.05);IL-17、IL-21含量均升高(P<0.05)。与阴性组比较,高剂量组24 h进食量、体质量、糖水偏好率均升高(P<0.05),粪便含水率、内脏疼痛评分均降低(P<0.05),结肠组织HE染色显示炎症浸润减少、间质水肿减轻;结肠组织中IL-17、IL-21含量降低(P<0.05)、IL-22含量升高(P<0.05);结肠组织中Claudin-1、E-cadherin与OCLN蛋白表达量升高(P<0.05)。中剂量组仅有E-cadherin蛋白表达量升高(P<0.05),IL-17、IL-21含量降低(P<0.05),IL-22含量升高(P<0.05),其他指标变化不明显。低剂量组上述指标较阴性组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 藿砂口服液可以增加脾虚夹湿证PI-IBS大鼠24 h进食量、体质量,升高糖水偏好率,同时降低粪便含水率、内脏疼痛评分,减轻结肠炎症反应,从而修复结肠黏膜屏障功能。