天麻钩藤饮调控PI3K/AKT通路改善自发性高血压合并血管性认知障碍模型大鼠认知功能机制研究

Research on the Mechanisms of Tianma Gouteng Decoction Regulating PI3K/AKT Pathway to Improve Cognitive Function in Spontaneous Hypertension Combined with Vascular Cognitive Impairment Model Rats

目的:从磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路角度探索天麻钩藤饮改善自发性高血压合并血管性认知障碍(VCI)模型大鼠认知功能的作用机制。方法:选择雄性自发性高血压大鼠(SHR)若干,采用改良双侧血管阻断法制备高血压合并血管性认知障碍模型,成模后采用随机数字表法分为模型组、盐酸多奈哌齐组(阳性药物组,每日给药量0.45 mg/kg)以及天麻钩藤饮高剂量组(每日给药量17.8 g/kg)、中剂量组(每日给药量11.9 g/kg)、低剂量组(每日给药量5.9 g/kg),每组6只,另取6只京都种Wistar大鼠作为正常组。各组大鼠每日灌胃给予相应药物或生理盐水,连续6周。采用Morris水迷宫试验检测各组大鼠的逃避潜伏期、目标象限停留时间及穿越平台次数,苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠海马CA1区神经元的病理改变,尼氏(Nissl)染色观察各组大鼠海马CA1区尼氏小体数量及形态,蛋白质印迹(Western blotting)法检测各组大鼠海马组织磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化AKT(p-AKT)蛋白相对表达量,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠海马组织半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)、脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白含量。结果:Morris水迷宫试验结果表明,模型组大鼠逃避潜伏期明显长于正常组(P<0.05),穿越平台次数明显少于正常组(P<0.05),目标象限停留时间明显短于正常组(P<0.05);各给药组上述指标均较模型组显著改善(P<0.05)。HE染色、Nissl染色结果提示,模型组大鼠海马神经元的数量和形态有所破坏,海马神经元的尼氏小体减少;各给药组大鼠海马神经元的数量和形态均有所改善,阳性药物组和天麻钩藤饮中、高剂量组大鼠海马神经元的尼氏小体数量增加,形态恢复。模型组大鼠海马组织p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量明显低于正常组(P<0.05),阳性药物组和天麻钩藤饮高剂量组大鼠上述指标明显高于模型组(P<0.05)。模型组大鼠海马组织Caspase-3含量明显高于正常组(P<0.05),BDNF含量明显低于正常组(P<0.05);各给药组大鼠上述指标均较模型组有显著改善(P<0.05)。阳性药物和天麻钩藤饮高剂量对上述各指标的改善作用较天麻钩藤饮中、低剂量更优,天麻钩藤饮对上述各指标的改善作用表现出一定的剂量依赖性。结论:天麻钩藤饮可能通过促进AKT、PI3K蛋白磷酸化,抑制Caspase-3蛋白表达,促进BDNF蛋白表达,减轻海马神经元凋亡,从而改善自发性高血压合并VCI大鼠的认知功能。