胰酶消化法用于TB-DNA扩增的痰标本前处理及结果分析

目的 探讨胰酶对痰的消化作用及用于荧光定量PCR(FQ PCR)检测TB DNA的可行性。方法 用市售胰酶配制悬液 ,确定胰酶浓度、pH、激活剂 ,按 1∶1用量观察胰酶对痰的液化能力、对FQ PCR的影响 ,并与结核培养阳性率进行比较。 结果 5 %的胰酶悬液 (pH8.0、CaCl2 为激活剂 )对痰的消化力明显强于单纯的碱 (2 %NaOH)消化 ,且时间短、稀释小 ;对FQ PCR的扩增无影响 ;阳性率 (33.3% )明显高于培养阳性率 (12 .6 % )。结论 胰酶消化法用于痰标本的前处理是可行的 ,不仅缩短了液化时间 ,提高了阳性率 ,且易于准确定量。