载BMP-2基因纳米粒缓释微球的制备及其成骨诱导效能的研究

目的构建多聚精氨酸-壳聚糖/p BMP-2纳米粒,探讨包封多聚精氨酸-壳聚糖/p BMP-2纳米粒的PELA微球的体外成骨诱导效能。方法构建多聚精氨酸修饰的壳聚糖多聚物,并与BMP-2质粒基因凝聚成纳米粒子,检测其表征。荧光显微镜及Western blot分析其体外细胞转染效能。进而,将纳米粒子包入PELA微球,与MC3T3-E1细胞共培养,检测BMP-2蛋白表达,茜素红染色分析其成骨诱导分化效能。结果多聚精氨酸-壳聚糖/p BMP-2纳米粒粒径(81.39±22.96)nm,能有效介导BMP-2基因转染MC3T3-E1细胞,转染率高于裸质粒组及壳聚糖/p BMP-2纳米粒组(P<0.05)。PELA微球呈球形,粒径为(43.34±15.24)μm,包封率达(67.49±0.85)%,42 d内累积释药(56.87±5.09)%,与MC3T3-E1共培养,第7天BMP-2分泌量达最高(64.348±2.396)pg/m L,21 d后分泌量仍能达到(51.763±1.789)pg/m L。茜素红染色钙结节形成数量明显高于对照组。结论多聚精氨酸-壳聚糖能有效凝聚BMP-2基因成纳米级粒子,促进细胞转染,并可通过PELA微球的包封实现纳米粒的长效缓释,促进成骨分化。