中华地鼠雌性不孕症模型的建立及其评价

目的建立与人生长激素释放激素(GHRH)有93%同源性的中华地鼠不孕症模型,为研究新型人源性GHRH肽在治疗不孕症方面提供试验基础。方法 40只5周龄雌性中华地鼠,随机分为模型组[环磷酰胺组、尿促性素(h MG)组和新型GHRH组]和生理盐水组,每组10只。模型组每周1次腹腔注射环磷酰胺(20 mg/kg),连续5周。从第4周开始,h MG组、新型GHRH组分别后腿肌肉注射h MG(200 U/kg)、新型GHRH肽(8 mg/kg)验证模型,每周2次,连续6周。在实验6~8周,雌鼠模型与正常雄鼠1∶1同笼交配。在实验9~10周,交配鼠分开饲养。实验鼠每周称重1次。实验结束后,实验鼠脱颈处死,计数怀孕鼠,摘取卵巢做HE和TUNEL染色。结果各组实验鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。卵巢HE染色,环磷酰胺组多见闭锁卵泡,少见原始卵泡和初级卵泡,未见黄体。h MG组和新型GHRH组有大量的原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡,并有黄体。TUNEL染色显示,环磷酰胺组的阳性细胞远远高于其他实验组(P<0.05,P<0.01)。环磷酰胺组总怀孕率为0,与新型GHRH组60%和h MG组50%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 20 mg/kg的环磷酰胺不会导致实验鼠体重明显改变,显示亲本动物对其子代发育和生长没有影响,该剂量环磷酰胺引起暂时性和可逆性动物不孕。