枇杷SRAP标记体系优化及对枇杷矮化杂交种的鉴定

通过单因素分析试验对枇杷SRAP扩增程序中退火温度和扩增体系中4个主要因子DNA、d NTPs、Taq酶及Primers含量进行优化,在此基础上对枇杷矮化杂交种861品系的真实性及其与8个白沙枇杷品种间亲缘远近关系进行了SRAP标记鉴定与分析。结果发现:(1)优化后的枇杷SRAP体系(15μL)为:1.5μL 10×PCR buffer(Mg2+plus),9.9μL dd H2O,36 ng DNA,1.2μL 2.5 mmd/L d NTPs,0.48μL 10μmd/L上下游Primer,0.24μL 2.5 U/μL Taq酶;SRAP后35个循环中退火温度优化为50℃(引物Tm>48℃时)或45℃(引物Tm<48℃时)复性1 min。(2)6对SRAP引物在矮化杂种861品系中均扩增出父本特异带,表明其为真实杂交种。(3)杂种861品系与8个白沙枇杷品种可被划分为3大类群(由近及远):5个江苏枇杷资源品种群(包含杂种861及其父本)、浙江栽培品种宁海白和实生冠玉类群(3个品种)。以上结果表明,优化后的SRAP体系能良好适用于枇杷杂种鉴定和亲缘关系分类等枇杷分子辅助育种工作。