摘要
解联蛋白（disintegrin)是一类存在于蛇毒中的血小板凝集抑制因子。研究表明，Arg-GLT-Asp(RGD)序列与解联蛋白的生物学活性有密切关系。紧靠RGD序列两翼的氨基酸残基有调节解联蛋白抑制ADP-诱导血淖板凝集作用，RGD序列侧翼的第45位氨基酸残基位于该类蛋白内部形成的小槽内，这个小槽在RGD袢形成发夹结构方面起重要作用，在此基础上，本文进一步分析了RGD袢形成发夹结构方面起重要作用，在此基础上，本文进一步分析了RGD袢上游区域氨基酸残基在调节解联蛋白功能中的作用。具体方法是：用基因点突变技术将华丽蛇毒素的K^41K^42K^43R^44T^45I^46突变腹蛇毒素的S^41K^42A43G44T45I46和S^41K42A43G44I46。然后分析突变蛋白的结构。性质和功能变化。结果表明，前一种突变K^41K42A^43R^44T45I46→S^41K^42A^43G^44T^45I^46显著地降低了华丽蛇毒素对血小板凝集和抑制活性，后一种突变S^41K^42A^43G^44T^45I^46→S^41K^42A^43G^44I^46有效地恢复了华丽蛇毒素抑制血小板凝集的作用。同时，这两种突变也改变了含点突变基因的pGEX-3X质粒在受体细胞（E.coli)内的表达。例如，重组于pGEX-3X质粒的野生型腹蛇毒基因和华丽蛇毒素基因以可溶性形式表达，而重组于相同载体的点突变基因表达的目的蛋白是不溶性的，为此，本文又通过构建表达难溶蛋白载体的方法获得了突变基因的可溶性表达产物。本文首次证实了RGD上游的39-45位氨基酸残基与解联蛋白的结构和功能有密切关系。
