光叶花生两个重要基因片段的克隆和序列测定(英文)

Cloning and Sequencing of Partial Coding Sequences of Two Genes of Economic Importance from Arachis glabrata Benth

从不亲和野生花生ArachisglabrataBenth中提取DNA,在多重序列比对的基础上设计PCR引物,成功扩增出约350、750bp的两个片段,与DES和RS基因片段预期分子量相符。PCR产物与T载体连接,转化受体菌XL1 Blue,获得了白色菌落。挑取白色菌落在液体培养基中过夜培养,经TTE溶液和热处理后进行PCR扩增,获得了载有目的基因片段的阳性重组子。测序和序列比对分析的结果说明,DES和RS基因片段克隆成功。这是首次从不亲和野生花生A.glabrataBenth中克隆出的基因片段。该片段可用作探针克隆相关基因全编码区。