利用聚合酶链反应技术新发现的牛雄性特异性DNA片段

我们依据牛Y染色体特异性DNA探针ES8的第1—20bp和541—560bp的碱基顺序,合成一对引物,用PCR方法扩增公牛和母牛染色体DNA,在扩增公牛DNA时发现四种前所未知的DNA片段,即使扩增的雄性DNA量为10^(-6)μg时,也可得到这些片段。用双脱氧末端终止法分析这些DNA片段的碱基顺序时,发现没有一个片段能与ES8完全配对,而只能与ES8部分配对。四个片段与ESg序列的一致率分别为:92bp片段(I0—1)为65％;142bp片段(I0—2)为51%;170bp片段(I0—3)为57％;224bp片段(I0—4)为84％。与公牛和母牛DNA杂交结果证明这些片段的雄性特异性,结果表明,本研究得到的这四种DNA片段可用作牛雄性特异性DNA片段。