影响鸡IBV血凝因素及HI试验抗原制备的研究

选择没有自然血凝性的三个标准IBV毒株 (M41、Gray、T株 )和四个由西北农大禽病研究室分离的陕西省地方株〔X、Fu、W和H株 (有自然血凝性 )〕 ,在非免疫鸡胚上增殖后 ,用蔗糖透析法浓缩 10倍 ,再分别采用三种方法处理 ,制备IBV -HA抗原 :1)用浓缩 4倍的兔A型魏氏梭菌培养液滤液 (R .W .F .C4)处理IBV ;2 )用 2 .5U/mlI型磷酸酯酶C(PLC1)处理IBV ;3)用 1%胰酶处理IBV。结果显示 ,除T株仍不具有血凝性外 ,其余毒株都有了较高的血凝价。IBVM41株、X株HA效价株高达 2 8,Fu、Gray、W、H株的HA效价也达 2 7- 2 9。但是 ,用方法 3)来制备HA抗原没有任何实用价值。因为 1%胰酶本身具有非常强的非特异性凝集作用 ,非特异性HA价高达 8log2 。而采用R .W .F .C4和2 .5U/mlPLC1处理IBV浓缩毒制得的IBV -HA抗原 ,除T株外 ,均能凝集鸡红细胞 ,且该凝集作用可被特异的IBV抗血清所抑制 ,而不能被ND、EDS - 76、IBD等其它鸡病阳性血清所抑制 ,说明该抗原具有较强的特异性。本试验还对影响IBV血凝试验和血凝抑制试验的各种因素进行了研究。比较了用R .W .F .C4和用 2 .5U/mlPLC1处理IBV制备HA抗原血凝价 ,结果显示二者的血凝价是一致的 ,所以完全可以用廉价的兔A型魏氏梭菌培养液代替昂贵的PLC1作为抗原处理液。