核酸夹心杂交法半定量检测人IL-1α mRNA

目的 建立一种半定量检测人外周血单个核细胞 (PBMC)表达IL 1αmRNA的方法。方法 确定RT PCR反应体系及扩增循环的各项参数 ,确定酶联夹心杂交反应所需的试剂、试剂的配制及杂交反应的温度、时间。选择最适数量的PBMC进行RT PCR并用核酸夹心杂交法检测扩增产物。结果 本方法检测IL 1αmRNA的灵敏度明显高于RT PCR琼脂糖凝胶电泳 ;无非特异性阳性信号出现 ,重复性良好 ,操作简便。结论 本方法是一种较好的定量检测IL 1αmRNA的方法 。