受体TLR4在血管平滑肌细胞上的表达意义

目的研究受体TLR4在血管平滑肌细胞上的表达意义。方法培养入主动脉平滑肌细胞(HASMCs),传到7-9代,以10 ng／mL脂多糖(LPS)作用于HASMCs24h。应用琼脂糖电泳鉴定基质金属蛋白酶(MMP)-2、9的逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)产物:Western-印记法测定LPS作用24h后,MMP-2、9蛋白表达量的变化:明胶酶谱法测定MMP-2、9的活性; EMSA法测定动脉平滑肌细胞核因子-κB(NF-κB)的结合活性、抗受体TLR4抗体抑制LPS激活受体(TLR4)及吡咯烷二硫代氨基甲酸盐抑制NF-κB的结合活性。结果LPS通过其受体TLR4调节MMP-9 mRNA的表达,上调的MMP-9 mRNA同时能够翻译表达更多量的MMP-9蛋白;而对MMP-2蛋白的表达无影响。LPS通过其受体TLR4使血管平滑肌细胞内MMP-9表达增加的同时,使MMP-9酶解活性相应增加;而LPS对MMP-2的酶解活性也没有产生影响。LPS能够通过其受体TLR4影响血管平滑肌细胞内NF-κB的结合活性。受体TLR4依赖NF-κB激活途径调节MMP-9的表达。结论LPS通过TLR4-NF-κB途径调节血管平滑肌细胞MMP-9 mRNA和蛋白表达及其活性;而激活受体TLR4对MMP-2 mRNA和蛋白表达及其活性无影响。