内皮细胞Jagged1下调促进PDGF诱导大鼠平滑肌细胞的增殖迁移

目的探讨内皮细胞Jagged1表达对PDGF诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖迁移的调节作用。方法分离培养大鼠主动脉内皮和平滑肌细胞,将内皮接种于下室、平滑肌接种于上室建立细胞共培养体系,根据内皮是否行Jagged1小RNA干扰分为对照组、空载体组和Jagged1小RNA干扰组。用Western印迹法检测内皮细胞Jagged1基因的干扰效率。于下室加入PDGF(10μg/L)干预24 h后分别用3H-TdR掺入和平滑肌迁移计数检测平滑肌细胞增殖迁移能力,用Western印迹法检测平滑肌细胞α-SM-actin蛋白表达。结果与对照组相比,空载体组内皮细胞Jagged1蛋白表达差异无统计学意义,Jagged1小RNA干扰组内皮细胞Jagged1蛋白光密度相对值明显降低(0．26±0．02比0．67±0．02, P<0．05);PDGF+空载体组平滑肌3H-7dR掺入量和迁移数与PDGF组相比差异无统计学意义, PDGF+Jagged1小RNA干扰组平滑肌3H-TdR掺入量和迁移数较PDGF组增高[3H-7dR掺入(23 074±2 702) cpm／well比(16 442±1 803) cpm／well,n=5, P<0．05;迁移(27±4) cells／field比(15±3) cells／field, n=5, P<0．05];PDGF+空载体组平滑肌α-SM-act in蛋白表达与PDGF组相比,差异无统计学意义, PD6F+Jagged 1小RNA干扰组平滑肌α-SM-actin光密度相对值较PDGF组降低(0．25±0．06比0．49±0．04,n=3,P<0．05)。结论内皮细胞Jagged1下调促进PDGF诱导的平滑肌细胞增殖迁移,提示血管内皮细胞Jagged 1表达在维持平滑肌收缩表型、抑制平滑肌过度增殖迁移中起一定调控作用。