CRISPR/Cas9技术用于细胞系基因敲除效率的研究

目的:探讨CRISPR/Cas9技术在构建基因沉默稳定细胞系的效率。方法:构建表达p53基因sg RNA的CRISPR/Cas9系统载体p X260-p53,转染293T细胞,经嘌呤霉素筛选后,提取细胞系基因组进行测序。结果:CRISPR/Cas9系统载体p X260-p53能敲除细胞中的p53基因,敲除效率为29.41%。结论:成功构建敲除p53基因的CRISPR/Cas9系统载体p X260-p53并检测其敲除效率,为构建基因沉默稳定细胞系提供了新思路。