miR-96-5p在氯胺酮依赖的大鼠心脏中的表达及钩藤碱干预作用

目的检测miR-96-5p在氯胺酮依赖大鼠心脏中的表达水平,同时观察钩藤碱对氯胺酮诱导的miR-96-5p表达变化的影响。并对miR-96-5p进行生物信息学分析,探讨miR-96-5p对氯胺酮依赖及钩藤碱干预后的作用机制。方法大鼠分成3组,每组6只[空白对照组,氯胺酮组(10 mg/kg),氯胺酮+钩藤碱组(60 mg/kg)]。建立大鼠氯胺酮条件位置偏爱模型(CPP),观察钩藤碱对CPP效应的干预作用;采用quanttative Real-time PCR(qPCR)检测大鼠心脏中miR-96-5p的表达水平;采用三个靶基因数据库(miRanda,miRDB,TargetScan)预测miR-96-5p的靶基因;采用DAVID数据库对其靶基因进行功能聚类分析(GO)和生物通路(KEGG pathways)分析;以STRING在线分析软件对其靶基因蛋白进行相互作用分析。结果经过4天CPP训练后,氯胺酮能够明显增加大鼠在白箱的时间(P<0.05),钩藤碱干预后,能够减少大鼠在白箱的时间(P<0.05)。qPCR结果显示与空白对照组比较,氯胺酮组miR-96-5p表达上调(P<0.05);与氯胺酮组比较,氯胺酮+钩藤碱组miR-96-5p表达下调(P<0.05)。三个靶基因数据库预测miR-96-5p共同靶基因90个,其功能主要富集于跨膜运输,心脏发育和多细胞生物体生长等生物学过程,涉及MAPK信号通路,胆碱能突触和cGMP-PKG信号通路。miR-96-5p靶基因编码蛋白之间存在复杂的相互作用,其中Map2k1, Pak1, Lrrc4, Mras, Mtor,Irs1, E14ebp2等在蛋白互作网络中具有核心地位。结论氯胺酮和钩藤碱干预后诱导心脏中miR-96-5p表达水平改变,并miR-96-5p可能通过跨膜运输,心脏发育等生物过程,作用于MAPK信号通路,参与氯胺酮依赖过程中对心脏的损害机制。