两头尖多糖的柱前衍生化高效液相色谱指纹图谱及模式识别研究

目的建立PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)柱前衍生化HPLC法测定两头尖多糖的单糖组成,并结合聚类分析法、主成分分析法(PCA)建立两头尖多糖指纹图谱评价体系。方法采用Diamonsil C_(18)色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),以0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(NaH_2PO_4-Na_2HPO_4,pH 6.8)-乙腈(83:17,V/V)为流动相进行洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为250nm。通过对12批两头尖多糖样品进行测定,采用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"和聚类分析辅助手段计算相似度等相关参数;并运用PCA法对指纹图谱进行统计分析,以各主要色谱峰的保留时间和峰面积为变量建立得分图和载荷图,并用对照品指认色谱峰。结果建立了两头尖多糖指纹图谱共有模式,标定了10个共有峰,并指认了其中的7个共有峰,分别为D-甘露糖、D-核糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖、L-岩藻糖,12批两头尖多糖的相似度为0.890～0.978。PCA结果表明,前3个成分的累计贡献率达到87.973%,选择这3个因子即可对两头尖多糖进行综合评价。结论将HPLC指纹图谱结合聚类分析、主成分分析进行模式识别对两头尖多糖质量控制是一种有效的评价方法。