人胎脑组织神经干细胞的分离培养、克隆和分化

目的 :从人胚胎脑组织中分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞 ,并在体外大量扩增。方法 :利用无血清培养技术和单细胞克隆技术从 4月龄人胚脑皮层和中脑中分离培养出神经干细胞 ,加入BrdU让其扩增 ,待形成大量神经干细胞球后 ,部分克隆球进行Nestin和BrdU的免疫荧光标记 ,另一部分神经干细胞球接种于含血清的培养基中让其贴壁分化 ,2周后分别行MAP -2、GFAP和CNP免疫荧光检测。结果 :神经干细胞球Nestin和BrdU免疫荧光检测均呈阳性。神经干细胞球分化后的细胞呈MAP-2、GFAP和CNP阳性。结论 :人胚脑组织中分离得到的神经干细胞具有自我更新和增殖能力 ,并具有分化为神经元。