Tropic1808基因表达蛋白的免疫组织化学研究

目的 :制备Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体 ,对其表达蛋白在损伤大鼠坐骨神经中的表达与分布进行研究。方法 :用Tropic180 8基因重组蛋白作为抗原免疫BALB/C小鼠 ,有限稀释法获得分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,取切断 12天后的SD大鼠坐骨神经的近侧端和远侧端 ,利用Tropic180 8基因重组蛋白单抗进行免疫组织化学染色。 结果 :获得 2株识别Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体的细胞株Ⅱ 4B、Ⅲ 4C。ELISA法测定杂交瘤细胞培养上清及体内成瘤后产生的腹水抗体效价分别为 1∶80、1∶10 4;杂交瘤细胞染色体数平均为 90～ 10 2 ;亚类鉴定单抗的重链为小鼠IgG1,轻链为κ型。损伤神经的近侧端和远侧端施万细胞均有Tropic180 8基因表达蛋白的表达 ,远侧端的强度和面积强于和大于近侧端。 结论 :成功制备了Tropic180 8基因重组蛋白的单克隆抗体。