反相高效液相色谱法测定血清中双环醇的含量

目的:建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)快速检测双环醇血药浓度。方法:用10％高氯酸和20％三氯乙酸直接沉淀血清蛋白,氯仿抽提血清杂质,离心后取上清液进行色谱分析。色谱柱为Supeeol-C18(5 μm,4.6 mm×250mm)不锈钢柱,流动相为甲醇-水-乙腈(51:43:6),流速1.2mL·min-1,紫外检测波长为254 nm,进样量20μL,柱温22℃,以联苯双酯为内标。结果:血药浓度在0.1-4.0 g·L-1峰面积与浓度呈良好的线性(r=0.998 5),色谱峰分离良好,无干扰,平均回收率大于97.59％(n=5),日内RSD<4％,日间RSD<6％(n=5)。结论:该法简便,快速,定量准确,适用于双环醇临床药动学和生物利用度的研究。