摘要
为探索慢病毒载体介导的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ) cDNA在培养细胞中的表达水平, 及重组慢病毒应用于血友病B基因治疗的可行性, 分别构建由肝特异性启动子ABP调控的hFⅨ的慢病毒载体FAXW, 以及由泛肽-C调控的hFⅨ慢病毒载体 FUXW; 用磷酸钙法, 将慢病毒载体与包装质粒CMV△R8.2和包膜质粒VSV-G共转染产毒细胞293 T, 以制备重组慢病毒.重组FUXW病毒分别感染293 T, BHK和L-02细胞, 经检测皆有hFⅨ蛋白表达.重组FAXW病毒感染细胞48 h后, 仅在L-02细胞检测到hFⅨ高表达(630 ng/106细胞), 而在其他感染细胞中hFⅨ表达较低.将重组FAXW病毒经尾静脉途径注射入血友病B小鼠体内, 小鼠血浆中可检测到接近治疗水平的hFⅨ抗原(45 ng/mL), 且持续时间超过60 d.上述结果表明, 慢病毒载体介导的基因转移为血友病B基因治疗提供了极有潜力的方法.
出处
《科学通报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2003年第18期1949-1953,共5页
Chinese Science Bulletin
基金
国家“八六三”高技术研究发展计划(批准号:2001AA217181)资助项目.
