钙调素拮抗剂小檗胺逆转K562／ADR细胞株多药耐药的研究

目的：研究钙调素拮抗剂小檗胺(BBM)抑制白血病细胞增殖并逆转细胞多药耐药的作用。方法：以四唑氮蓝(MTT)法测定小檗胺对K562细胞、耐阿霉素K562细胞(K562／ADR)的增殖抑制作用并求得其IC50；测定联合应用阿霉素和：BBM后K562／ADR细胞对阿霉素的IC50值及其增敏倍数。采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法检测小檗胺作用前后K562／ADR细胞多药耐药基因(MDR)在mRNA水平的表达，应用免疫组织化学方法测定P170表达量。结果：小檗胺能显著抑制K562及K562／ADR细胞增殖，其IC50值分别为5．32μg·mL^-1和10．97μg·mL^-1。联合应用阿霉素和1μg·mL^-1小檗胺使K562／ADR细胞对阿霉素的IC50由5．94μg·mL^-1降低至2．93μg·mL^-1，其增敏倍数为2．03倍。8μg·mL^-1小檗胺作用K562／ADR细胞24h后P170的表达量由85．45％降低至63．86％，72h后MDR1mRNA的表达以μ—actin为内参照的半定量比值也由处理前的1．625降至0．877。结论：小檗胺对K562、K562／ADR有显著的增殖抑制作用，小檗胺能部分逆转K562／ADR细胞对阿霉素的耐药，其作用是通过抑制MDR1在mRNA和P170水平的表达而实现的。