荧光RT-PCR检测NDV人工感染肉鸡组织脏器的应用研究

用 6株新城疫病毒分离株人工感染 2 8日龄肉鸡 ,感染后 3天采集咽喉拭子和泄殖腔拭子 ,对死亡鸡进行病理剖检 ,取心、肝、脾、肺、肾、小肠、腿肌、胸肌等 ,制备组织脏器悬液 ,作倍比稀释 ,用建立的荧光RT -PCR方法检测并同鸡胚分离比较。试验表明 ,荧光RT -PCR检测组织脏器和拭子的敏感性同鸡胚分离的敏感性基本一致 ,荧光RT -PCR检测脏器的最低检测量为 5X10 -5,肌肉的最低检测量为5X10 -3,拭子的最低检测量为 10 -3。用不同的样品处理方法处理样品做荧光RT -PCR表明 ,裂解液处理样品方法优越 。