抑制消减杂交在干细胞研究及组织修复中的应用

Application of suppression subtractive hybridization to study of stem cells and tissue repairing

干细胞(stemcells)是指具有自我更新和多向分化潜能的细胞,它们在组织修复(细胞疗法和组织工程的种子细胞、基因治疗的载体)研究中具有无可比拟的优越性。但目前干细胞基本生物学特性及应用研究中仍有诸多问题尚未阐明,特别是基因和分子水平的机制仍远未阐明。机体组织和细胞基因表达的变化能灵敏、细致地反映生长、发育、分化的发生机制,分析细胞或组织间基因差异表达(differentialexpression)是阐明其活动机制的重要方法。抑制消减杂交(suppressionsubtractivehy-bridization,SSH)技术是一种新近发展的差异基因筛选技术,它是以抑制PCR(suppressionPCR)为基础,将标准化检测子cDNA单链步骤和消减杂交步骤合为一体的技术,具有假阳性率低、敏感性高、速度快、效率高等特点。SSH技术已被国内外很多研究者所采用,克隆了多种新基因。近来应用SSH技术对涉及干细胞分化调控机制进行了初步研究,这对深入研究干细胞生物学特性及应用奠定了基础。随着SSH技术的不断完善,它在包括干细胞及组织修复等方面的研究中将发挥重要作用。