高表达Sptlc2基因促油酸诱导的HSC-T6细胞凋亡及自噬

目的明确神经酰胺从头合成途径关键酶丝氨酸棕榈酰转移酶长链亚基2(Sptlc2)对肝星状细胞(HSC-T6)凋亡及自噬的影响。方法体外培养HSC-T6细胞株,分正常对照组、油酸组、空载体组、Sptlc2转染组,除正常对照组外,其余各组均采用100μmol·L-1油酸共培养HSC-T6细胞。转染48 h后,检测各组HSC-T6细胞内Sptlc2 m RNA表达情况。流式细胞仪检测各组HSC-T6细胞凋亡情况。MDC染色法荧光显微镜下观察各组HSC-T6细胞内自噬体数量。Western blotting技术检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2,自噬标志蛋白LC3B,自噬相关蛋白Atg5、Beclin-1的表达情况。结果 Sptlc2转染组总凋亡率明显升高,与油酸组、对照组比较差异具有显著统计学意义(P<0.01)。MDC染色示,Sptlc2转染组与油酸组、空载体组比较,自噬体数量明显增多。Sptlc2转染组凋亡相关蛋白Bax表达明显增加,凋亡相关蛋白Bcl-2表达明显减少,Bax/Bcl-2比值明显变大,与油酸组、空载体组比较差异具有显著统计学意义(P<0.01);Sptlc2转染组与油酸组、空载体组比较,自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ表达明显增加,自噬标志蛋白LC3B-Ⅰ表达明显减少,LC3B-Ⅱ/LC3B-I比值明显变大,差异具有显著统计学意(P<0.01);同时,自噬相关蛋白Beclin-1、Atg5表达均增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论油酸可以诱导HSCT6细胞凋亡及自噬。上调神经酰胺从头合成途径关键酶Sptlc2可以促进油酸诱导的HSC-T6细胞凋亡及自噬。