红树植物耐盐基因转化烟草及耐盐品系的培育

从耐盐性强的红树植物白骨壤(Avicennia marina)中分离出的耐盐基因CSRG1,构建了pGAM189/CSRG1转基因载体,以烟草嫩叶为外植体,通过农杆菌介导的叶盘转化法将CSRG1基因及GUS基因,Kmr基因和Hygr基因转入烟草基因组中.转化50个外植体,经过50 mg/L潮霉素和150mg/L卡那霉素抗性筛选共获得了13个稳定抗性株系.通过PCR扩增检测、southern blot分析和GUS基因活性检测,结果表明,最终获得的11个转基因品系(基因转化频率为22％)中,CSRG1基因整合到烟草的染色体DNA上.Northern blot分析结果表明,CSRG1基因在转基因植株中获得表达.耐盐性测定和光合速率测定结果表明,转基因植株在盐分提高到2％NaCl和全海水(盐度为24)配置的MS培养基中,成活率保持在80％-90％,株高增长20％-40％,CSRG1基因的表达产物及形成的生理代谢途径确实可使烟草获得较高的耐盐性,同时这种耐盐性不仅针对钠离子胁迫,而且对于各种离子的综合盐胁迫都具有耐受性.