HPV16 E6与结核杆菌HSP70 N端真核表达载体的构建及表达

目的 :将HPV16E6与结核杆菌HSP70N端进行重组 ,构建真核表达载体 ,建立HPV16E6阳性细胞株 ,最终制备抗宫颈癌的DNA疫苗。方法 :用分子重组技术 ,设计相应的酶切位点 ,直接将HPV16E6与结核杆菌HSP70N端进行尾首连接 ,使位于同一个阅读框架。以pCDNA3 1( +)为载体 ,构建真核表达载体pCDNA3 1/E6 HSP70N。用电穿孔的方法转染HeLa细胞 ,细胞免疫化学及Westernblot鉴定转化细胞中HPV16E6的表达。结果 :正确构建了真核表达载体pCDNA3 1/E6 HSP70N ,在转化细胞中检测到了HPV16E6的表达。结论 :成功构建了真核表达载体pCDNA3 .1/E6 HSP70N 。