从福尔马林固定-石蜡包埋淋巴组织抽提RNA的影响因素研究

Study on the factors involved in RNA isolation from formalin-fixed and paraffin-embedded lymphatic tissues

目的 探讨从福尔马林固定 石蜡包埋 (FFPE)淋巴组织提取RNA的影响因素。方法 以新鲜淋巴组织为对照 ,改变福尔马林固定时间及组织裂解方法 ,采用 2 2对TCRVβCDR3区域特异性引物 ,观察从FFPE淋巴组织提取RNA的产量及其作为RT PCR模板的扩增效率。结果 蛋白酶K法提取效率显著高于Trizol法 ,所提取RNA的可扩增性随福尔马林固定时间的延长而下降 ,TE 70℃孵育 60min去修饰处理可显著提高所提RNA的可扩增性。结论 从FFPE组织提取RNA完全可行 ,尽量短的固定时间、蛋白酶K消化及去修饰处理是必要的。