摘要
用孕酮6β-半琥珀酸-辣根过氧化物酶作酶标和孕酮-7α-羧乙基-硫醚-BSA抗血清的酶免疫试验来测定牛全乳内的孕酮。首先和微量平板上用精制的有亲合力的绵羊IgG与兔IgG发生反应,用1μl全乳(用缓冲溶液将全乳稀释20μl)、100μl酶标和100μl抗血清混匀,置暗处90分钟完成免疫反应。冲洗微量平板后,加入酶底物溶液150μl,混匀置暗处40分后反应停止。在波长450nm测定其光密度。度数曲线的灵敏度在0.8—40Pg/孔范围,相当于0.8—40ng/ml。用酶免法(EIA)和放免法(RIA)对牛周期乳样内孕酮浓度进行同步测定,两种方法所获得的0.91全相关与估计值一样。结果表明,用EIA测定牛乳样孕酮比用RIA法灵敏度提高了十倍。
