L-脯氨酸羟基化酶的提纯及活性研究

目的 :以猪肺为原料 ,提取能把游离的L -脯氨酸羟化为L -羟脯氨酸的羟基化酶。方法 :把新鲜猪肺在提取液中低温高速匀浆 ,然后用 4 0 0 0r min离心分离 2 0min ,取上清液进一步用 80 0 0r min高速离心后 ,分别用盐析和有机溶剂的方法提取羟基化酶 ;结果 :不同的方法都得到棕色的固体。经电泳测定该固体纯度高 ,溶于水中后能把游离的L -脯氨酸羟化为L -羟脯氨酸。测定其分子量约为 6 6 ,0 0 0 ;等电点约为 4。结论 :所采用的提取工艺流程具有简单、效率高和实用的特点 ,且猪肺便宜、易得 ,适合较大规模的制备。