单细胞凝胶电泳技术检测小鼠骨髓细胞DNA损伤

目的:探索并优化单细胞凝胶电泳技术并评价其在环境有害物致骨髓细胞DNA损伤检测中的应用价值。方法:离体小鼠骨髓细胞分别用0.1 mmol/L、1.0 mmol/L、10.0 mmol/L氯化镉37℃处理1 h后,制成凝胶,用pH 10.0的冷裂解液裂解1 h,稳压25 V、电流80 mA电泳1 h,中性化后用荧光染料染色,在波长为450-490nm的荧光显微镜下观察并统计100个细胞,计算彗星细胞的百分率。结果:氯化镉处理的离体小鼠骨髓细胞的彗星细胞率明显高于对照组(P<0.001)。结论:本方法在原有单细胞电泳技术的基础上加以优化,可以灵敏地检测出骨髓细胞的DNA损伤,可广泛用于环境等对骨髓细胞DNA损伤的研究。