浙江省血液信息网与血液信息管理系统的研究

本研究旨在研发国内首个省级区域的血液的中心数据库和实时联网的血液信息网络。研究中运用多局域网数据库独立运行、实时数据集中分发机制和异地备份技术,以及光纤VPN网技术。结果:构建了国内首个省级行政区域的血液系统中心数据库和覆盖全省血站的省级区域的血液信息管理广域网,实现了全省血液数据的实时交换。结论:本系统研发的成功促进了无偿献血,保证了医疗用血的安全、及时、合理、有效,保障了重特大突发事件时的医疗急救用血,奠定了浙江省内血液的集中化检测及各血站血液盈亏调配的基础,为国内建立省级行政区域或国家级的血液数据库和血液信息网积累了经验。

RHD基因的克隆及其在K562细胞中的表达

本研究目的在于克隆人类红细胞RHD基因,构建RhD表达载体,观察其在K562细胞中的表达。从脐血网织红细胞中提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应扩增RHD/CE基因,扩增产物通过TA连接克隆到pGEMT质粒,采用测序方法筛选多个克隆获得RHD基因。将获得的RHD基因进一步亚克隆构建pcDNA3.1(-)表达载体,重组表达载体通过superfect试剂盒转染K562细胞,最后观察K562细胞中RHD基因的转录和表达。结果表明:成功分离克隆到RHD基因,构建的pcDNA3.1(-)重组表达载体经酶切和测序证实RHDcDNA序列及插入方向正确。转染后的K562细胞内有相应的mRNA转录,细胞表面有RhD抗原表达。结论:RHDcDNA转染的K562细胞能表达RhD抗原,该表达体系有助于进一步研究各种RhD变异型的分子基础。

用PCR-SSP方法对血小板抗原-1基因分型

人类血小板特异性抗原（ｈｕｍａｎｐｌａｔｅｌｅｔａｎｔｉ－ｇｅｎ，ＨＰＡ）的分型对于诊断同种免疫血小板减少性紫癜、输血后紫癜以及血小板输注无效等具有重要意义［１］。已发现的ＨＰＡ至少有１６个，其中血小板特异性抗原系统－１（ＨＰＡ－１）的对偶抗原有ａ、...

尸肾移植中人类白细胞抗原-Ⅱ类配型

目的：探讨同种异体尸肾移植中ＨＬＡ－Ⅱ类抗原配型的可行性。方法：应用基因分型技术，对２７例尸肾移植供体和４９例受体进行ＨＬＡ－ＤＲＢ、ＤＱＢ回顾性分型。结果：在这些未做配型而进行移植的供－受者中，ＨＬＡ－ＤＲＢ、ＤＱＢ完全配合率分别仅为２．０％和１０．２％，完全不配合率分别为３０．６％和８．２％；将这些供体与受体作ＨＬＡ－Ⅱ类配型后再作选择性移植，则同为这些供、受者，其ＨＬＡ－ＤＲＢ、ＤＱＢ的完全配合率分别可达８．２％和４０．８％，而完全不配合率仅为１０．２％和０。完全不配合的受者移植效果要比其他受者差。结论：在尸肾移植中进行ＨＬＡ－Ⅱ类配型，不但可行。

D抗原定型和抗体筛检1859例

D抗原是仅次于A、B抗原的最重要的红细胞抗原,在临床上具有重要意义。检查受血者与供血者之间在D抗原方面相合情况及检测可导致溶血性输血反应的血型抗体,是确保安全输血的重要措施。我们自1993年7月对需输血患者作D抗原定型和抗体检测,现将结果报告如下。

Rh血型的分子生物学

编码Rh血型抗原的基因有两个:RhCE基因和RhD基因,其中CE基因的构成己被阐明,全长约75kb,包含10个外显子和9个内含子。两种基因的cDNA皆已被克隆,CcEe cDNA和DcDNA之间仅有41个核苷酸的不同,相应的RhCcEe和RhD蛋白之间有36个氨基酸残基的差异。

血浆置换治疗原发性纯红细胞再生障碍性贫血1例缓解报告

Messner等(1981)首次报告血浆置换(简称PE)治疗纯红细胞再生障碍性贫血(简称纯红再障)1例获得成功后,其他学者又报告2例,国内尚未见报道.最近,我们采用PE治疗对肾上腺皮质激素及环磷酰胺等无效的原发性获得性纯红再障1例,获得完全缓解.现报告如下.

异体LAK细胞输注治疗慢性乙型肝炎近期疗效观察

近年来国内对清除血清HBV DNA及e抗原的治疗作了不少探索。LAK细胞作为一种过继免疫疗法用于治疗慢性乙型肝炎已有报导。笔者自1992年始用血细胞分离机CS—3000采集异体淋巴细胞,制备LAK细胞治疗慢性乙型肝炎29例,结果表明异体LAK细胞治疗付HBV DNA和e抗原有明显的清除作用。现报告如下。

应用固相红细胞粘附试验检测PAIgG

血小板表面相关抗体(PAIg)大多为IgG,PAIgG的测定是ITP的主要诊断指标之一。文献报道ITp患者90％以上PAIgG增高。pAIgG的检测,目前国内主要应用酶免疫试验,该试验虽可定量,但操作较繁琐,实验误差较大。我们应用美国Immucor公司的固相红细胞粘附试验(SolidPhase Red Blood Cell Adherence Assay)检测 PAIgG,具有简便、省时、稳定等优点,比较适合临床应用,现报道如下。

人类白细胞抗原B_(27)的基因定型

人类白细胞抗原Ｂ２７的基因定型３１０００３浙江医科大学附属第一医院严力行傅启华朱俊传统的人类白细胞抗原Ｂ２７（ＨＬＡ－Ｂ２７）定型方法为血清学试验，由于在ＨＬＡ各位点抗原之间存在着复杂的交叉反应性，故血清学试验存在判断失误的可能，特别是定型经验不足或...

血浆采集系统(PCS)应用于血浆置换术

血浆交换(PE)能减少各种有害物质,包括自身抗体、同种异体抗体、免疫复合物、单克隆蛋白、炎性介质和外源性毒素等。其临床应用日趋广泛。用手工法进行大量血浆交换较困难,血细胞分离机又因费用昂贵限制了其应用。本院于1993年始用美国Haemonetics公司的血浆采集系统(Plasma collection system.PCS)进行血浆置换术,取得较好效果,现总结如下。1 材料和方法1.1 病例 女性4例,男性2例,年龄32～43岁,平均38.4岁。其中系统性红斑狼疮(SLE)2例,纯红细胞再生障碍性贫血(纯红再障)。

有偿献血人群庚型肝炎病毒感染情况调查

庚型肝炎病毒(Hepatit is Gvirus,HGV或GBV-C)是新近发现的一种人类致肝炎病毒。HGV属于黄病毒科,为单股正链RNA病毒,基因组全长约9.4Kb,它在全球范围内均有不同程度的分布。目前国内外对HGV的研究才开始起步,尤其是关于HGV临床与流行病学的研究更为有限。已有的研究表明HGV可经过血液传播,它在美国献血员的流行情况较HCV更为严重。本文报道了我省有偿献血人群HGV的流行情况。

血液安全--把握技术进步与有限资源间的平衡

无论技术层次的如何演化,输血医学的核心与目标是血液安全.当生命科学在进行基因组、蛋白质组、转录组、代谢组、生物信息、发育生物学等平台上的搭建、整合时,技术进步的惯性推动输血医学进入以人类基因组计划(HGP)为依托的"系统、组"的时代,对于血液安全的认识水平不断提高,对于资源的需求也提出了前所未有的要求.……

中国人罕见的cisAB变异型分子机制分析

为研究中国人群ABO血型系统中罕见的cisAB变异型的分子遗传背景,用血型血清学方法鉴定12例ABO血型疑难样本和116例随机无血缘关系样本,应用聚合酶链反应和DNA序列分析等方法对样本ABO基因酶活性编码区外显子6、7和侧翼内含子进行突变筛选和检测,并对不同基因型的扩增片段进行单倍体序列分析。血清学检测发现12个样本均为(A强B弱)或(A弱B强),PCR产物直接序列分析表明这些样本均为cisAB变异型,并存在4种基因型。通过单倍体序列分析,从中发现2种cisAB等位基因,其中cisAB01不仅存在外显子7的467C>T和803G>C变异,还在第6内含子存在未经报道的163T>C和179C>T变异;另一种等位基因是在B101基础上保留了A101的803G位点,编码一条176G、235S、266M和268G组合的多肽链。经检索,未发现该组合的ABO等位基因,该等位基因已被国际血型抗原基因突变数据库命名为cisAB05等位基因。文章系统研究了中国人群cisAB变异型分子机制,发现了一种新的cisAB05等位基因,同时根据内含子序列推测cisAB01等位基因可能是通过A101和B101等位基因间的同源交换而形成的。

我国5城市合格献血者血液HIV及HCV残余风险研究

目的研究我国献血者血液HIV及HCV残余风险;评估我国开展血液核酸检测(NAT)的可行性和必要性。方法采集乌鲁木齐、昆明、北京、广州、杭州5城市献血者血样,用Chiron Procleix HIV-1/HCV Assay血液核酸检测体系,对各项血清学筛查均合格的89 467份血液作16人份混合血样NAT检测,凡筛查不合格血样再作单人份检测;对于抗-HCV阴性而HCV RNA NAT阳性者,用备用管作抗-HCV、ALT、及HCV RNA NAT复检。结果共检出HCV RNA NAT阳性但抗-HCV EIA阴性标本3例,未检出HIV RNA NAT阳性但抗-HIV EIA阴性标本;在87 034份血清学筛查合格献血者中,检出HCV NAT阳性2例,其中1例复检ALT为254U/L,未检出HIVNAT阳性;在2 613份血清学筛查不合格者中,检出1例HCV NAT阳性但抗-HCV EIA阴性标本,该献血者抗-HIV阳性、ALT 372U/L;未检出HIV NAT阳性但抗-HIV EIA阴性的标本。结论血清学筛查使我国的血液安全性已有相当高的保障;而NAT技术可进一步提高血液的安全性,但在我国是否可应用于常规血液筛查,需考虑成本与效益比。此外,ALT筛查对排除抗-HCV漏检血液仍有一定的作用。

血清学和分子生物学鉴定Lewis血型抗体引起的输血反应

为了分析1例溶血性输血反应产生的原因,用谱细胞和Le(a-b-)表型细胞鉴定患者血清中的抗体,用抗Lea和抗Leb血型试剂鉴定患者红细胞表型,用PCR测序方法分析LE基因(FUT3基因)全编码区序列。结果表明:患者血清中有抗Lea和抗Leb抗体,血型表型为Le(a-b-),LE基因型为无效等位基因纯合子(le59,508)。结论:抗Leb抗体可引起溶血性输血反应,患者FUT3基因突变导致Le(a-b-)表型。