肝细胞癌细胞外基质的分布形式及其临床意义

目的：了解细胞外基质在肝细胞癌的分布形式，探讨其与肝细胞癌恶性程度的关系。方法：用５种细胞外基质抗体对４０例肝细胞癌作免疫组化染色。结果：显示４种分布形式：连续梁周腺泡周型、断续梁周腺泡周型、血管间质型、胞膜胞浆型。前３型与肿瘤生长方式、细胞分化和增殖程度密切相关。结论：提示细胞外基质在评价肝细胞癌的恶性程度是有用的标志物。

BRCA1基因的功能及其上游调控序列结构功能特征

乳腺癌易感基因 1(BRCA1)是一种与家族性乳腺癌、家族性卵巢癌密切相关的抑癌基因。但其在散发性乳腺癌中尚未见突变的报道 ,而在散发性乳腺癌中其表达下降 ,说明其转录调控异常可能参与散发性乳腺癌的发生。本文拟对BRCA1功能及上游调控区结构功能特征作一综述。

Ⅴ型腺病毒纤维蛋白基因真核表达质粒的构建及表达

目的 :构建腺病毒纤维蛋白基因的真核表达质粒 ,并检测其在真核细胞中的表达 ,为腺病毒靶向性载体构建创造条件。方法 :采用限制性内切酶技术 ,酶切腺病毒骨架质粒pAdEasy 1,经多次亚克隆 ,最后完成克隆纤维蛋白基因并构建其真核表达质粒。用脂质体法将构建好的真核表达质粒瞬时转染COS 7细胞 ,于转染后 72h ,用Westernblot法检测所表达的蛋白。结果 :克隆成功纤维蛋白基因 ,并构建纤维蛋白基因真核表达质粒pcDNA/Fiber,经限制性内切酶酶切鉴定及测序证实了其正确性。Westernblot结果显示 ,新表达蛋白在变性条件下大小为 6 2kD ,而在非变性条件下为 186kD。结论 :纤维蛋白基因真核表达质粒能在真核细胞中表达 ,产物具有三聚体结构 ,可用于腺病毒靶向性载体的构建。

Ⅴ型腺病毒纤毛基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的克隆腺病毒纤毛基因,为构建腺病毒靶向性载体创造条件。方法应用限制性内切酶酶切技术酶切腺病毒骨架质粒pAdEasy1,经多次亚克隆最后完成克隆纤毛基因并构建纤毛基因原核表达载体。用IPTG诱导纤毛蛋白的表达,再用SDS-PAGE和Westernblot对其进行分析。结果成功地克隆纤毛基因。质粒pBS/Fiber经限制性内切酶酶切鉴定及测序证实了其正确性。经质粒pQE/Fiber转化的细菌,在IPTG诱导下可表达一种新的蛋白,并于5h表达量最高。经Westernblot证实,在变性条件下表达蛋白的Mr为62000,在非变性条件下为186000。结论已克隆的纤毛基因能在大肠杆菌中表达,并具有三聚体结构,可用于腺病毒载体靶向性构建。

BRCA1基因相关乳腺癌及其临床病理特征

BRCA1为近期发现的乳腺癌 卵巢癌易感基因 ,与遗传性乳腺癌 /卵巢癌的发生密切相关。BRCA1相关乳腺癌发病早、双侧比例高、复发率高、可伴有其它肿瘤 ,表现为乳腺癌综合征。预后存在争议。其组织学分级较高、细胞分裂增殖活跃 ,侵袭性较强 ,组织学类型以髓样癌和 /或非典型髓样癌多见 ,P5 3突变较常见。BRCA1突变筛查已经开始应用于临床 ,但其大规模应用尚存在一定的局限性。

膨胀型肝癌病理组织学和PCNA的免疫组化研究

对３０例膨胀型肝癌（ＥＨＣＣ）进行病理组织学和ＰＣＮＡ免疫组化研究。证实ＥＨＣＣ具有独特的生物学特性，它呈膨胀性生长，往往有包膜形成，分化较好，侵袭性较小，增殖速度较低。但它只是一定时期呈膨胀性生长，具有向浸润性肝癌转化的趋势。

广州市育龄妇女宫颈HPV分子流行病学分析

目的 了解广州市育龄妇女生殖道HPV感染及分布情况。方法 采用整群抽样的方法对该市各行业 5 0 0例有性生活史育龄职业妇女进行问卷调查及宫颈HPV的PCR检测。结果 5 0 0例育龄妇女宫颈HPV阳性检出率为 8 0 % ,其中系广州市常驻户口的阳性检出率为 6 6 % ,暂驻户口的阳性检出率为 12 3% ,组间比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。 5 0 0例妇女中 ,受过高等教育的HPV阳性检出率为 4 2 % ,未受过高等教育的阳性检出率为9 5 % ,统计学比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。另外 ,HPV阳性检出率在年龄、职业、是否吸烟、月经初潮年龄、初次性生活年龄、生育胎儿数、性伴侣是否包皮过长、采取何种避孕措施等各组间统计学比较差异均无显著性。结论 受教育程度较低的妇女及外来女工HPV感染机率较高 ,有必要提高文化程度较低职业妇女的卫生保健知识 ,尤其是外来女工 。

腺病毒携带GFP在豚鼠耳蜗基因转导的形态结构与功能改变

目的 带有绿色荧光蛋白 (GFP)基因的腺病毒注入豚鼠耳蜗后 ,观察不同时间段GFP基因的表达和分布情况及手术操作对听力的影响 ,为内耳基因治疗提供理论依据。方法 1 5只杂色豚鼠术前及术后行听性脑干反应 (ABR)和畸变耳声发射 (DPOAE)检查 ,空白对照组经圆窗或底回钻孔注入人工外淋巴液。实验组注入带有GFP基因的腺病毒。分别于 3、5、7和 1 0d后取材 ,耳蜗标本经硝酸银染色后铺片。结果 腺病毒注入耳蜗后对听阈影响不大。术前术后的DP值有差异。荧光显微镜下可见 3d组表达产物最高。 7d后逐渐减弱 ,1 0d后更弱 ,表达产物主要分布于支持细胞、螺旋神经节细胞和基底膜下的间皮细胞。对照组均无绿色荧光。结论 通过圆窗或底回注入腺病毒对听阈没有影响。单一位点的接种就能使神经营养因子通过耳蜗液扩散到整个耳蜗。有效的基因转移在耳蜗是可行的 ,但表达相对短暂。

反义HSP70真核表达载体的构建和在人喉癌细胞的表达

目的 进行促凋亡治疗喉癌实验 ,构建和鉴定携带反义HSP70 (heatshockprotein 70 )基因的真核表达载体。方法 将HSP70cDNA反向克隆入 pcDNA 3.1,构建CMV启动子控制的真核表达载体 pcDNA AHSP70 ,用酶切鉴定结果 ;应用该载体转染人喉表皮样癌细胞Hep 2 ,G4 18筛选阳性克隆 ;westernblot和免疫组化检测转染前后瘤细胞的HSP70的表达。检测转染前后瘤细胞的生物学性状。结果 获得 pcDNA AHSP70真核表达载体 ,HSP70反义RNA阻断了Hep 2细胞的HSP70的表达 ,经westernblotting和免疫组化证实 ,实验组瘤细胞不能表达或低表达HSP70 ,而对照和空载体组高表达HSP70。转染反义HSP70的真核表达载体的Hep 2细胞比空载体组和对照组的细胞生长缓慢 ,细胞周期可见实验组出现亚二倍凋亡峰 ,而空载体组没有。结论 本研究成功构建了反义HSP70真核表达载体并在人喉癌细胞得以表达。

膨胀型肝癌光镜、电镜和免疫组化观察

对３０例膨胀型肝癌和２０例浸润型肝癌作病理组织学分析，并对２０例膨胀型和浸润型肝癌进行超微结构和免疫组化研究。结果显示，膨胀型肝癌的生物学特性和浸润型肝癌显著不同。膨胀型肝癌癌组织分化较好、侵袭性较小、增殖程度较低、癌巢周围基膜发育良好、瘤结节周围均有包膜而呈膨胀性生长，但包膜内浸润的微癌灶十分常见，多达７０％。提示此型有潜在的较强侵袭性和向浸润型肝癌转化的倾向。

广州市妇女宫颈细胞学普查结果分析

目的探讨妇女保健工作新策略。方法对10a来妇科宫颈细胞学普查结果进行系统分析。结果10a来Ⅲ～Ⅴ级细胞比率呈逐年下降趋势，近年来未见Ⅳ、Ⅴ级细胞。45岁以上妇女Ⅲ－Ⅴ级细胞比率高于45岁以下妇女，且不同职业妇女Ⅲ～Ⅴ级细胞比率也不同，厂矿女工比率最高。结论宫颈细胞学普查在防癌工作中有重要意义。应加强厂矿女工，尤其是45岁以上妇女的保健工作。

BRCA1在散发性乳腺癌中的表达及意义

目的 探讨BRCA1在散发性乳腺癌发生发展中的作用。方法 应用免疫组化技术对5例正常乳腺组织、10例良性病变乳腺组织及55例乳腺癌组织进行BRCA1免疫染色,比较BRCA1在良恶性乳腺组织中表达差异以及与乳腺癌临床病理特征之间的关系。结果 BRCA1在全部良性乳腺组织中均呈阳性显色,BRCA1染色深度分级中3+细胞占100％,阳性细胞数分级中4+细胞占100％,其全部定位于细胞核。然而只有80％(44/45)的乳腺癌组织BRCA1呈阳性反应,BRCA1染色深度分级中3+细胞只占22％,阳性细胞数分级中4+细胞只占22％,其亚细胞定位除细胞核外,也见于胞浆甚至胞核和胞浆同时存在。Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级乳腺癌其阳性细胞数分级中3+～4+细胞分别占70％、50％、10％;染色深度分组中2+～3+细胞分别占77％、66％、20％;细胞核定位率分别为77％、75％及40％。上述差异均有统计学意义(P<0.05)。BRCA1与乳腺癌组织学分型、肿块大小及发病年龄无相关关系。结论 BRCA1在乳腺癌组织中表达下降,亚细胞定位异常,可能参与散发性乳腺癌的发生发展。

DISTRIBUTION PATTERNS OF EXTRACELLULAR MATRICES IN HEPATOCELLULAR CARCINOMA AND THEIR CLINICAL SIGNIFICANCE

Objective: In order to find out the distribution patterns of extracellular matrix (ECM) in hepatocellular carcinoma (HCC) and explore the relationshi between distribution patterns and hepatocellular caricnoma malignancy. Methods: Forty cases of HCC were studied by immunohitochemistry with 5 antibodies of anti-ECM. Results; Four types of distribution patterns were found: 1. continuous peritrabecular or periacinar type; 2. discontinuous peritrabecular or periacinar type; 3. vascular stroma type; 4. membrane and cytoplasmic type. The former 3 types were correlated closely with the growth pattern, cell differntiation and proliferation of tumor. Conclusions: ECM were useful marker for valution of malignant degree in HCC.

THE HISTOPATHOLOGICAL TYPING OF 48 CASES OF ESOPHAGEAL ADENOCARCINOMA AND ITS TISSUE ORIGIN

Of 2487 cases of esophageal carcinoma pathologically confirmed after resection in 1978-1988 in Shantou,adenocarcinoma accounted for 1.93% (48 cases).These were divided into 6 types;Ordinary well-differentiated adenocarcinoma, 10 cases;Ordinary poorly-differentiated adenocarcinoma,11 cases;Adeno-squamous carcinoma,18 cases;Muco-epidermoid carcinoma, 4 cases;“Basal Cell-Like Carcinoma”, 4 cases;Cylindroma-Like carcinoma, 1 case.Mucohistochemistry and immunohistochemistry studies revealed some differences among these types;And their prognosis also varied. The tissue origin of these tumors were discussed.

肝癌细胞外基质的免疫组化研究

对４０例肝细胞癌（ＨＣＣ）进行纤维粘连蛋白（ＦＮ）、层粘连蛋白（ＬＮ）及Ⅳ型胶原（ｃｏｌⅣ）免疫组化染色。结果发现三种成分有类似分布。它们的分布与ＨＣＣ分化程度及生长方式密切相关，在高分化ＨＣＣ和膨胀型ＨＣＣ其分布方式主要为连续的索周型，而在低分化ＨＣＣ和浸润型ＨＣＣ则多为中断的索周型。