茶叶中儿茶素含量的快速测定方法研究

建立一种简便、快速的儿茶素测定方法,满足于茶叶质量的鉴定。采用室温下儿茶素的羟基与香草醛的醛基反应生成浅红色的缩醛,利用反应产物的可见吸收特性对儿茶素质量分数进行测定。实验结果表明,儿茶素质量浓度在0～11.232μg/mL范围内时,具有良好的线性关系,反应产物于30～60 min内测定较稳定(RSD=0.95%),回收率为97.98%(RSD=0.41%)。该方法快速准确,可用于茶叶中儿茶素含量的检测。

儿茶素提取新工艺

优选用溶剂萃取法提取、测定茶叶中儿茶素的方法。以乙醇为浸提液,采用香草醛一浓盐酸法测定茶叶中儿茶素的含量,并通过正交实验确定提取茶叶中儿茶素的最佳工艺条件。儿茶素溶液的最大吸收波长为506 nm。儿茶素浓度与吸光度间的回归方程为:A=0.058X+0.059,R2=0.994。正交实验结果表明,儿茶素的最佳提取和纯化条件为:在pH值为4的条件下,以60%的乙醇为溶剂,料液比为1∶15(g/mL),于60℃下恒温浸提30 min。影响儿茶素含量的因素依次为:pH值>乙醇浓度>浸提时间>料液比>提取温度。通过研究茶叶中儿茶素的提取、测定方法,确定了经济、高效、实用的提取分离工艺,建立了简便、准确的儿茶素含量测定方法。

二维超高效液相色谱质谱联用技术测定注射用头孢地嗪钠的杂质谱

目的建立二维超高效液相色谱质谱联用法研究注射用头孢地嗪钠的杂质谱。方法一维色谱采用Waters HSS T3C_(18)(100mm×2.1mm,1.8μm);以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾0.87g,无水磷酸氢二钠0.22g,加水溶解并稀释至1000mL)为流动相A,乙腈为流动项B,梯度洗脱;柱温:35℃;流速:0.4mL/min;检测波长:215nm;进样量:3μL;二维色谱采用Waters BEH C_(18)(50mm×2.1mm,1.7μm);以0.1%甲酸水溶液为流动相A,0.1%甲酸的乙腈为流动项B,切峰后开始B相3min由2%到95%;柱温:35℃;流速:0.4mL/min;质谱采用Xevo G2-XS QTof MS系统,离子源为ESI源,离子源温度:110℃,毛细管电压:3.0KV,雾化器温度:450℃,雾化器流速:800L/h,扫描范围:m/z 100~2000,测定头孢地嗪主要杂质的一级和二级质谱,进行结构解析。结果采用UPLC梯度洗脱方法可检出多种头孢地嗪异构体、降解杂质和高分子杂质等,检出杂质的个数和总量均较现行法定标准多。结论本品的杂质在原料合成、制剂分装及运输储藏过程中均可产生,因此,应对原料和制剂生产过程中的关键技术指标和环境条件加以控制。

醋酸曲普瑞林有关物质HPLC分析方法研究

目的:建立HPLC法测定醋酸曲普瑞林中4种已知杂质和其中未知杂质。方法:采用C18色谱柱XTERRARP18(250 mm×4. 6 mm,5μm),以0. 068 mol/L磷酸盐缓冲液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速1. 5 ml/min,检测波长220 nm,柱温35℃。结果:曲普瑞林与4种已知杂质峰及未知杂质峰分离良好。醋酸曲普瑞林在3. 7～36. 8μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系(r=0. 999),D-丝氨酸4-曲普瑞林、D-酪氨酸5-曲普瑞林、游离酸及D-亮氨酸7-曲普瑞林分别在3. 0～30. 3、3. 0～30. 1、3. 2～31. 6和3. 6～35. 6μg/ml浓度范围内线性关系良好(r均为0. 999),检出限分别为15、14、16和18 ng,平均回收率分别为100. 3%、100. 9%、98. 0%和99. 0%,RSD分别为1. 1%、0. 5%、0. 9%和1. 0%。结论:该方法专属性好,适用于曲普瑞林有关物质的测定。

鹿瓜多肽注射剂质量评价与研究

研究鹿瓜多肽注射剂的新鲜度、高相对分子质量物质、多肽含量测定、溶血与凝聚及生物学活性等指标,为鹿瓜多肽注射剂质量标准修订提供理论参考。首先,对影响终产品新鲜度的因素包括生物胺含量、黄曲霉毒素、甜瓜子原料的酸价和过氧化值等进行考察。建立丹磺酰氯柱前衍生-HPLC法测定鹿瓜多肽注射剂中8种生物胺的含量,方法学验证结果显示该法专属性、精密度、线性关系以及回收率等均良好,适用于鹿瓜多肽注射剂中生物胺类成分的检测,样品测定结果显示个别样品中检出较高浓度的尸胺;黄曲霉毒素、甜瓜子原料的酸价和过氧化值测定结果表明:部分生产原料甜瓜子存在霉变、酸败等问题,提示含动植物源性成分的多组分生化药质量标准应在新鲜度方面加强控制。其次,改进了鹿瓜多肽注射剂质量标准中高相对分子质量物质和多肽含量测定的方法。采用Tricine-SDS-PAGE电泳法代替凝胶色谱法测定高相对分子质量物质,提高了测定的准确性;采用试剂盒法代替福林酚法测定多肽含量,该法操作简便、专属性更强,可适用于高通量样品测定。最后,对鹿瓜多肽注射剂质量标准中缺失的溶血与凝聚、生物学活性测定项目进行了研究。研究结果显示,样品均无溶血与凝聚现象;鹿瓜多肽注射剂对单核巨噬细胞THP-1具有增殖抑制作用,且所检测样品的体外抗炎效果具有一定差异。优化后的检测方法更适用于鹿瓜多肽注射剂的质量检测,并为多组分生化药质量控制奠定了基础。

顶空气相色谱法测定眼氨肽制剂中乙醇残留量

目的:建立测定眼氨肽制剂中乙醇残留量的方法。方法:采用顶空气相色谱法,色谱柱为CP-WAX 52 CB FS(50 m×0.32 mm,5μm),程序升温,进样口温度为200℃,检测温度为220℃,检测器为氢火焰离子化检测器(FID),载气为氮气,载气流速为1.5 ml/min,分流比为20:1,顶空平衡温度为85℃,顶空平衡时间为20 min,顶空进样量为1 ml。结果:乙醇线性范围为0.4~303.4μg/ml,线性方程为Y=0.0054X-0.0057(r=0.9999);检测限为0.1μg/ml,定量限为0.4μg/ml;重复性试验RSD为0.53%;平均回收率为100.28%(RSD为1.80%,n=9)。结论:该方法操作简便、准确,精密度高、重复性好,可用于眼氨肽制剂中乙醇残留量的测定。

艾司唑仑片溶出度检测方法的建立以及溶出曲线评价

目的:建立艾司唑仑片溶出度HPLC检测方法及进行溶出曲线评价。方法:采用Waters C18(150 mm×4.6 mm,3μm)色谱柱,以乙腈-水(40∶60)为流动相,流速1 mL.min-1,检测波长223 nm;溶出度试验采用桨法,以水为溶出介质,转速50r.min-1。结果:在本文色谱条件下,艾司唑仑浓度在0.05～1.2μg.mL-1的检测范围内线性良好,色谱方法较好地对艾司唑仑溶出量进行了检测;溶出方法合适,较好地反映了不同厂家不同批次间艾司唑仑溶出行为的差异。结论:所建立的色谱条件简单方便,提高了溶出量检测专属性和准确性,改善后的溶出方法较好地体现了片剂间的差异。

HPLC法测定鲑降钙素鼻用喷雾剂中有关物质

目的建立测定鲑降钙素鼻用喷雾剂中有关物质的HPLC方法。方法使用Macherey-Nagel Nucleosil 100-5 C18AB色谱柱(250 mm×4.0 mm,5μm);以0.04 mol/L四甲基氢氧化铵溶液(用磷酸调pH 2.5)–乙腈(9∶1)为流动相A,以0.04 mol/L四甲基氢氧化铵溶液(用磷酸调pH 2.5)–乙腈(4∶6)为流动相B,梯度洗脱;检测波长为220 nm;体积流量为1.0 m L/min;进样量为100μL;柱温为65℃;样品室温度:10℃。按加校正因子的主成分自身对照法计算降钙素C、N-乙酰半胱氨酰鲑降钙素(杂质A)、9-D-亮氨酸鲑降钙素(杂质B)、去-22-酪氨酸鲑降钙素(杂质C)。结果降钙素C和鲑降钙素杂质A、B、C在0.20~7.50μg/mL线性关系良好,平均回收率分别为98.1%、98.9%、100.5%、99.7%,RSD值分别为1.6%、1.5%、1.0%、1.1%。杂质A、B、C的校正因子均超出0.90~1.10。结论方法简便、快速,可作为鲑降钙素鼻用喷雾剂中有关物质的检测方法。