把“合川白山羊”做成特色富民产业——记2020年度重庆市“百名新型职业农民”入选者何钢

明媚的阳光普照大地,万物生机盎然。放眼望去,牧草青青,远远听见山羊“咩咩”的叫声。何钢正忙着带领工人在饲料车间混合牧草、拌料,准备给羊喂食。“为了保障白山羊的健康,麻烦大家进入基地前先行消毒。”何钢见记者一行到来,放下手中的活计,一边说一边引着我们来到门口的一间小房间。小小的房间配置了专业的防疫消毒设备,首先是鞋底的清洁,在消毒池里浸十来秒,再用消毒水雾360度全方位地喷洒身体,从而避免参观人员携带有害病菌入场。

分析化学实验教学模式改革探索

分析化学实验是药学专业重要的基础课程,具有较强的实践性和应用性。总结目前分析化学实验课教学现状,探索该实验课的教学改革,提出课前视频学习结合线下预习的方法,采用以问题为导向和实验操作相结合的教学模式,增加学生自主设计实验的参与度,并将思政元素融入教学中,建立科学合理的考评方法。通过教学改革,培养学生学习能力和创新思维,提高当代大学生综合能力。

川黔紫薇LeAGL11基因克隆表达分析及转录自激活检测

【目的】探究转录因子AGL11在紫薇属紫薇自交及川黔紫薇与紫薇杂交过程中不同时间的差异性表达及其在酵母中的转录自激活特性,为研究紫薇远缘杂交结实率低的分子机制奠定基础。【方法】以‘紫韵’紫薇自交授粉和 ‘紫韵’紫薇ב川黔1号’川黔紫薇杂交授粉后 24、48 和72 h的雌蕊为材料,克隆LeAGL11基因,通过生物信息学分析其理化性质等,采用实时荧光定量方法分析该基因在不同授粉方式和不同阶段的相对表达量,通过DNA重组技术构建LeAGL11的酵母表达载体,转化至Y2HGold感受态细胞内进行转录自激活检测。【结果】从川黔紫薇中克隆得到LeAGL11基因,该基因的编码序列长666 bp,编码221个氨基酸,LeAGL11蛋白无信号肽和跨膜结构域,不属于膜蛋白,属于亲水性蛋白。氨基酸序列比对和进化树分析显示其与紫薇、石榴和葡萄的AGL11蛋白都有较高的相似度;蛋白质结构预测和序列分析表明其具有MADS-box基因家族中典型的MADS-box和K-box保守结构域。实时荧光定量试验分析不同阶段的相对表达量表明LeAGL11基因在杂交后呈现出上调的趋势,在自交后呈现出先下调后上调的趋势,在自交授粉24 h时相对表达量最高,自激活检测发现pGBKT7-LeAGL11重组质粒在缺色氨酸的培养基中生长,在SD/-Trp+AbA+X-α-gal培养基中没有发生颜色变化。【结论】LeAGL11基因在紫薇自交过程及川黔紫薇和紫薇杂交过程中的相对表达量具有一定的差异性,且LeAGL11无转录自激活活性,可用于后续试验。

13个紫薇品种花粉形态及花粉活力分析

【目的】研究紫薇品种间的花粉形态特征及花粉活力差异,为后续紫薇品种杂交育种工作提供理论参考。【方法】通过扫描电子显微镜对13个紫薇品种的雄蕊群花粉粒表面形态特征进行观察研究,每个品种随机选取10粒花粉进行统计分析,同时利用固体培养基对13个紫薇品种的花粉活力进行测定。【结果】13个紫薇品种长短雄蕊花粉粒均呈长球形,有3条萌发沟,裂至接近两极,萌发沟间未连接,在极面观花粉粒呈钝三角形,均属于N3P4C5型花粉。紫薇品种间花粉粒外壁纹饰、极轴长、赤道轴长、萌发沟特征及花粉粒体积大小均差异显著,其中花粉大小为538.91~1402.40μm^(2),极轴长为30.51~46.31μm,赤道轴长为17.35~31.49μm,萌发沟长为18.38~34.36μm,萌发沟脊宽为5.72~11.34μm。花粉外壁主要包括孔穴状、脑皱状及皱波状3种纹饰,13个试验品种长雄蕊花粉粒相比于短雄蕊花粉粒,其花粉粒表面更为光滑饱满。花粉活力测定结果以‘紫精灵’紫薇花粉活力最强,花粉活力为93.94%,其中‘湘韵’紫薇为不育品种,其不育类型表现为雄性不育,花粉不萌发。【结论】紫薇不同品种的花粉粒形态特征和花粉粒表面纹饰可以作为紫薇品种分类鉴定的参考指标之一,本试验中的13个紫薇品种除不育品种‘湘韵’紫薇外,其他试验品种表现出较高的花粉活力,均可作为紫薇品种杂交育种工作材料。

银杏叶多糖分离纯化、结构鉴定及抗氧化活性研究

目的:分离纯化银杏叶多糖(GBLP)并对其结构进行表征及抗氧化活性研究。方法:超声辅助提取制备银杏叶粗多糖,经精制除杂和阴离子交换柱分离获得多糖级分,采用高效凝胶过滤色谱(HPGFC)、气相色谱法(GC)分析相对分子质量和单糖组成;采用体外抗氧化方法评价银杏叶多糖抗氧化活性。结果:GBLP经分离后获得三个级分GBLPⅠ、GBLPⅡ、GBLPⅢ,其相对分子质量(Mw)分别为41861、361352、637533。GBLPⅠ由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成;GBLPⅡ和GBLPⅢ由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖组成,但其摩尔比不同。体外抗氧化实验表明GBLPⅢ对羟自由基的清除能力最强,其次为GBLPⅡ、GBLPⅠ、GBLP;而GBLPⅡ和GBLPⅢ对超氧阴离子清除能力相对较好,其次为GBLPⅠ、GBLP。结论:银杏叶多糖各级分的单糖组成比例、相对分子质量有差异;对羟自由基的清除作用强于对超氧阴离子的清除作用,对羟自由基的清除作用差异可能与Mw及结构相关。

金银花叶片绿原酸提取及工艺参数优化的研究

金银花叶片绿原酸含量仅次于花,通过醇法、超声波法、酶法3种不同方法提取单因素试验和正交试验,结果表明:提取效率酶法优于超声波法,超声波法优于醇法。醇法回流提取的最佳条件是温度90℃,φ=80%乙醇浓度,pH4.0,回流时间2 h,料液比1∶10;超声波法提取的最佳条件是温度50℃,φ=60%的乙醇浓度,pH4.0,超声波功率100 W,料液比1∶8;酶法提取最佳条件是26℃,20 g/L纤维素酶、10 g/L果胶酶,pH4.0,提取4 h,料液比1∶20。粗提取物对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有抑菌和杀菌活性。

分子生物学综合实验教学改革研究

文章介绍了分子生物学综合大实验所综合的相关课程、综合的实验内容、综合的实验方法与手段;提出了分子生物学实验设计思路。通过开展综合实验,培养了学生的创新意识和创新能力,学生解决问题的能力逐步得到加强和提高,收到了良好的教学效果。

国家森林公园规划中的游客调查研究——以陕西太白山国家森林公园为例

游客调查是旅游规划的基础和依据,国家森林公园因其生态旅游的开发属性,了解游客需求对于其规划和开发尤为关键。从游客行为分析、景点景区评价、旅游安排及消费、游客意见和建议、游客基本情况等几个方面对太白山国家森林公园进行了全面的游客调查,在深入分析调查结果的基础上,对游客关注的游客容量、游线设计、服务设施、解说系统等问题和公园的竞争策略和可持续发展等方面提出有针对性的规划建议。

生何首乌多糖的单糖组成及清除羟自由基的活性测定

测定生何首乌多糖的相对分子质量与单糖组成以及生何首乌多糖对羟自由基清除能力.用超声波辅助法提取生何首乌多糖;采用DEAE-650C纤维素柱分离、纯化生何首乌多糖;高效凝胶过滤色谱法测定分离组分的相对分子质量;利用PMP柱前衍生化HPLC分析单糖组成;通过Fenton反应产生(.OH)评价生何首乌多糖对羟自由基的清除能力.从生何首乌多糖中分离纯化出2个组分,分别命名为PMPS1,PMPS2,相对分子质量分别为87 449和132 499,PMPS1主要由甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖组成,摩尔比为1∶89.1∶3.2;PMPS2主要由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖组成,摩尔比为2.5∶1∶395.8∶3.8,PMPS1和PMPS2清除羟自由基的EC50值分别为2.86mg.mL-1,1.13mg.mL-1.生何首乌多糖的两个组分主要是由葡萄糖组成的杂多糖,其相对分子质量和单糖组成均不同,酸性多糖组分PMPS2对羟自由基的清除能力较强.

油茶低产林土壤改良对土壤养分及土壤酶活的影响

针对4种不同土壤改良措施改造的油茶低产林的土壤养分、酶活性进行了测定和分析。结果表明:4种土壤改良措施都有促进土壤养分释放的功效,配合有机肥施入的土壤改良措施对促进土壤养分释放和提高土壤酶活最有效;无论土壤改良与否,4种土壤酶活的垂直分布基本一致,但酶活性强度明显变化;相关分析表明,土壤有机质、氨态氮、速效磷、速效钾与土壤过氧化氢酶、蔗糖酶、脲酶、磷酸酶酶活呈正相关关系,其土壤有机质含量与4种酶活呈极显著正相关;氨态氮与过氧化氢酶活性呈极显著正相关,与蔗糖酶活性和磷酸活性呈显著正相关;速效磷与4种酶活相关关系不显著;速效钾与过氧化氢酶活性呈显著正相关。

南方枣品种花粉育性与花药内源激素的变化

对南方茶陵长枣、金丝小枣、糖枣、鸡蛋枣和冬枣的花粉发芽率进行了试验,并利用酶联免疫检测(ELISA)技术,研究其花药在黄蕾期、初开期、萼平期、瓣离期和瓣平期花药内源吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素核苷(ZR)和脱落酸(ABA)含量的动态变化。结果表明,南方各枣品种花粉育性与其花药发育期内源激素变化具有相关性;茶陵长枣、金丝小枣、糖枣花粉育性高,鸡蛋枣次之,冬枣最差;育性高的3个品种花药间内源激素含量差异不明显,但与鸡蛋枣差异显著、与冬枣花药间差异极显著;在IAA、GA3和ZR含量上,冬枣花药低于鸡蛋枣,远低于茶陵长枣、金丝小枣和糖枣;但在ABA含量上,冬枣花药高于其它4个品种花药,这种差异在萼平期达最大值。

金狮桂花丛生芽的诱导

以桂花品种金狮桂O.fragrans cv.Jinshi为材料,采取幼年型材料中下部饱满的腋芽茎段或成年型顶端的芽茎段作为外植体诱导丛生芽.结果表明：先用75%酒精消毒20 s,再用0.1%升汞消毒1.5 min,褐化率与污染率都较低,丛生芽的诱导率较高;金狮桂丛生芽的最佳诱导培养基为1/2MS＋NAA 0.2 mg·L^-1＋6-BA0.5 mg·L^-1＋30 g蔗糖;试验中发现加入PVP虽然可以降低桂花褐化率,但同时抑制了丛生芽的生长;在丛生芽的增殖培养中,添加0.1-0.5 mg·L^-1的6-BA与0.05 mg·L^-1的NAA,同时添加1.00 mg·L^-1的GA3丛生芽增值效果更佳.

HPLC-RI法测定食用酵母的海藻糖含量

目的:建立酵母海藻糖的提取方法,并比较啤酒酵母、葡萄酒酵母、高活性酵母、酿酒高活性酵母的海藻糖含量。方法:酵母菌体经液氮研磨后以乙醇-水溶液为溶媒,通过超声波辅助的方法提取海藻糖,采用HPLC法分析海藻糖含量。以酿酒高活性酵母为例,在单因素实验基础上通过正交实验优化酵母菌海藻糖的提取工艺,并比较4株食用酵母菌海藻糖的含量。结果:酵母菌细胞海藻糖提取的最优工艺条件为:在80℃的条件下,乙醇浓度为50%,料液比1∶15(g∶m L),提取时间70min,海藻糖得率达(68.10±0.7)mg/g,四株食用酵母菌海藻糖含量大小次序为:酿酒高活性酵母>高活性酵母>葡萄酒酵母>啤酒酵母。结论:优化的酵母海藻糖提取的工艺简单,得率高;方法学分析显示HPLCRI分析海藻糖含量方法准确,重现性好,方便快捷;不同生产用途的酵母菌株海藻糖含量存在差异。

人心果成熟胚离体培养及愈伤组织诱导

对越南人心果的成熟种胚进行离体培养诱导无菌苗,最佳培养基是MS,最佳激素配比是NAA0.2mg/L+BA5.0mg/L。再以无菌苗的茎为外植体进行不定芽的诱导试验,其结果表明,不定芽诱导的最佳培养基及其激素配比为MS+NAA0.2mg/L+2,4-D5.0mg/L,最佳环境条件是光照13h/d,光强2000lx,温度30℃。而以无菌苗的幼叶为外植体进行愈伤组织诱导和继代培养的最佳培养基为MS+6-BA2.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+IAA0.5mg/L。在继代培养过程中,5mg/L或10mg/L的AgNO3和2000mg/LPVP可抑制愈伤组织褐变。

不同比例尺下中国水系分维数关系研究

应用分形理论,再次验证整个中国水系及各流域水系分形特征的客观存在;通过比较1∶450万及1∶1 200万比例尺计算的分形维值大小及变化规律,表明单一尺度的分形规律在其它尺度下依然存在;大比例尺条件下计算得到的分形维值也大,且各层次不同流域的分维值在不同比例尺条件下的变化也呈现相同的趋势,表明图源比例尺对分维计算值的影响。

人心果乳汁成分的定性分析

对人心果果实乳汁水提取液、石油醚提取液及乙醇提取液化学成份的化学分析结果表明,人心果果实乳汁中含有氨基酸、多肽、蛋白质、糖类、酚类、黄酮类、生物碱、甾体、萜类、有机酸、鞣质、挥发油等化学成分;可能含有皂甙、强心甙、油脂等化学成分;不含苯醌类、香豆素、内酯类化合物等化学成分。其中萜类是最值得开发利用的一类化学物质。

大肠杆菌表达重组Taq DNA聚合酶的分离和纯化

以插入Taq DNA聚合酶基因的pET-24a表达质粒转化E．coli菌株,表达Taq DNA聚合酶,用反复冻融的方法裂解菌体．表达产物为可溶性蛋白,采用Duo-Flow系统(Bio-Rad)及S柱,Tris缓冲液pH为7．5．以0-1 mol／L盐梯度洗脱方式,收集洗脱峰．透析去盐可得到高纯度的产品．经PCR反应与商品Taq酶的一个活性单位相比较,重组的Taq酶活性有1个单位．用该方法可以从1 L培养液中分离得到5．51 mg产品．

仙茅属13个种群遗传多样性ISSR分析

为了解我国仙茅属植物种质资源分布情况及其亲缘关系,利用ISSR技术对来自湖南、广西、四川、云南、江西的13个种群的134份野生样本的遗传多样性进行了研究。利用筛选出的15条引物共扩增出256条清晰、重复性好的条带,多态性条带百分比达到91.79%;在种内水平上,多态性位点百分比为4.69%~29.30%,Shannon信息指数为0.028 3~0.160 5。13个种群中遗传多样性最高的为四川宜宾种群,多态性位点百分率为29.30%,Shannon多样性指数为0.160 5;云南9号种群遗传多样性最低,多态性位点百分率为4.69%,Shannon多样性指数为0.028 3。13个种群之间的遗传距离为0.187 1~0.513 1。根据遗传距离进行UPGMA聚类分析,13个种群共聚为2大类,四川宜宾与江西武功山种群最先聚在一起,二者的亲缘关系最近;广西雅长与四川盐边的种群聚在一起,说明二者亲缘关系较云南的较近。

仙茅根茎DNA的提取及其ISSR-PCR反应体系的优化

为了改进仙茅基因组DNA的提取方法,从而为其遗传多样性研究提供参考依据,以仙茅根茎为材料,采用CTAB法探讨了仙茅根茎DNA大量提取中CTAB浓度、PVP用量及Na Cl浓度对其DNA质量的影响情况。结果表明,仙茅根茎DNA的大量提取方法的最优组合为:CTAB的浓度为2%,PVP的加入量为0.20 g,Na Cl的浓度为4 mol/L。为了得到仙茅的最佳ISSR-PCR反应体系,以(CT)8 RG为引物,采用单因素实验与正交实验相结合的方法,得到的最优反应体系(25μL)为:1×PCR Buffer,模板DNA浓度为50 ng,Mg2+浓度为2.50 mmol/L,d NTPs浓度为0.20 mmol/L,引物浓度为0.40μmol/L,Taq DNA聚合酶浓度为1.50 U。

人心果胶实验室提取方法的研究

以人心果果实为材料,用溶剂法提取人心果胶,通过比较不同含量NaOH溶液(ω=5%, 10%, 15% )、不同温度、不同溶剂(甲醇、乙醚、石油醚)、不同抽提次数、不同提取时间、不同颗粒大小的原料对提胶效果的影响。结果表明,粉碎的细粒( <1mm)以ω=5% NaOH溶液在45℃下煮3h,再用浓HCl处理2h,用石油醚回流抽提3次,回流温度80℃,抽提时间为5h,效果较好。