香菇多糖对巨噬细胞一氧化氮合酶活性和还原型谷胱甘肽的影响

目的 研究香菇多糖 (LTN)对巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)活性和细胞内还原型谷胱甘肽 (GSH)水平的影响及其关系 ,探讨 L TN的免疫调节作用机制。方法 1观察 LTN诱导小鼠腹腔巨噬细胞 i NOS活性和细胞内 (GSH)水平的影响 ;2观察 m RNA转录抑制剂、蛋白质合成抑制剂和 NOS抑制剂对巨噬细胞 i NOS活性和细胞内 GSH水平的影响 ;3观察 GSH去除剂对巨噬细胞 i NOS活性的影响。结果 1 LTN诱导小鼠腹腔巨噬细胞 i NOS活性增加和细胞内 GSH减少 ;2 3种抑制剂抑制 L TN诱导的小鼠腹腔巨噬细胞 i NOS活性增加和细胞内 GSH减少 ;3GSH去除剂抑制 LTN诱导的巨噬细胞 i NOS活性。结论 LTN能增加小鼠腹腔巨噬细胞 i NOS的活性 ,并同时消耗细胞内的 GSH,提示细胞内GSH可能起到调节巨噬细胞 i NOS活性和保护宿主细胞免受 NO介导的细胞毒作用。

siRNA介导hPOT1基因表达抑制对HeLa细胞Caspase-3的影响

目的应用siRNA表达载体介导的RNA i技术,特异地抑制端粒保护蛋白POT1基因在HeLa细胞中的表达,并观察其对细胞Caspase-3活化的影响。方法利用作者课题组先前构建的含hPOT1基因特异性序列(hsDNA)的3种重组siRNA表达质粒(pmU6-shRNA1、pmU6-shRNA2和pmU6-shRNA3),由脂质体介导转染HeLa细胞,以RT-PCR和EM-SA法检测转染细胞中的hPOT1基因的表达抑制效果,并通过RT-PCR、W estern b lot和Caspase-3检测试剂盒分析Caspase-3表达和活化。结果3种pmU6-shRNA重组质粒转染HeLa细胞48 h后,细胞中hPOT1基因mRNA和蛋白质表达水平均降低,Caspase-3 mRNA表达水平基本无变化,Caspase-3酶原水平降低,而Caspase-3酶活性增高。结论siRNA表达载体介导的RNA i能有效地抑制HeLa细胞中hPOT1基因表达,hPOT1基因表达的抑制导致细胞Caspase-3活化。

香菇多糖对巨噬细胞一氧化氮生成和细胞内还原型谷胱甘肽的影响

目的 为探讨香菇多糖 (lentinan,L TN)激活小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮 (NO)生成的作用机制。方法观察 L TN对小鼠腹腔巨噬细胞 NO生成与细胞内还原型谷胱甘肽 (GSH)的影响及其关系。结果 (1) L TN对小鼠腹腔巨噬细胞 NO生成具有明显的促进作用 ,同时细胞内 GSH浓度随 NO生成增加而减少 ;(2 ) NO生成抑制剂能抑制 L TN刺激的小鼠腹腔巨噬细胞 NO生成和细胞内 GSH水平降低 ;(3) GSH去除剂能抑制巨噬细胞NO生成。结论 研究表明 L TN促进小鼠腹腔巨噬细胞 NO生成并同时消耗细胞内 GSH,细胞内 GSH水平可能与 NO的生成有密切关系。提示细胞内 GSH可能起到调节巨噬细胞 NO生成和保护宿主细胞免受

猪苓多糖对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮生成的影响及其机理

目的 探讨猪苓多糖 (PPS)的免疫调节和抗肿瘤作用机理。方法 观察了PPS对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮 (NO)生成和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的影响。结果 PPS对小鼠腹腔巨噬细胞NO生成具有明显的促进作用 ,呈剂量依赖关系 ,并与干扰素 γ(IFN γ)具有协同促进作用。这一促进作用能被RNA转录抑制剂放线菌素D、蛋白质合成抑制剂放线菌酮和iNOS抑制剂L NMA所抑制。结论 PPS可能单独或与IFN γ等协同作用诱导巨噬细胞iNOS从头合成 ,促进巨噬细胞NO生成 。

肿瘤坏死因子诱导肿瘤细胞凋亡及其调节机制的研究(英文)

背景肿瘤坏死因子(TNF)在体外能诱导某些正常细胞和大多数肿瘤细胞株(包括Hela细胞株)凋亡,其凋亡发生机制与细胞周期的关系中尚有许多问题需要探讨。目的研究细胞周期时相对TNF诱导Hela细胞凋亡的影响。设计非随机非对照实验研究。地点和对象实验在广东医学院生物化学与分子生物学研究所完成,对象为重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α,Sigma产品),Hela细胞株引自中国科学院上海细胞生物研究所。干预通过胸腺嘧啶核苷酸(TdR)阻断法阻滞Hela细胞的细胞周期,采用MTT法、流式细胞术和荧光染色分析TdR阻滞细胞和周期化的Hela细胞对TNF诱导凋亡的敏感性。主要观察指标TNF诱导TdR阻滞和周期化Hela细胞凋亡数。结果TdR阻滞细胞周期较周期化的Hela细胞对TNF诱导凋亡的敏感性降低。结论TNF诱导Hela细胞凋亡与细胞周期有关。

原花青素对肿瘤坏死因子-α诱导HeLa细胞凋亡和caspase-8活化的影响

目的研究原花青素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导HeLa细胞凋亡和caspase-8活化的影响。方法采用流式细胞术检测细胞凋亡,荧光检测试剂盒测定caspase-8活性,Westernblot检测caspase-8酶原表达水平。结果原花青素(5、10、20mg/L)对重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α,100μg/L)诱导的HeLa细胞凋亡均有显著的抑制作用(P<0.01),呈剂量依赖关系;原花青素(5、10、20mg/L)对rhTNF-α(100μg/L)诱导的HeLa细胞caspase-8活化均有显著抑制作用(P<0.01),呈剂量依赖关系;原花青素(5、10、20mg/L)对HeLa细胞caspase-8酶原表达无明显影响。结论原花青素抑制TNF-α诱导HeLa细胞凋亡可能与其抑制caspase-8活化有关。

细胞同步化对肿瘤坏死因子诱导Hela细胞凋亡的影响

目的 研究细胞周期时相对肿瘤坏死因子 (TNF)诱导Hela细胞凋亡的影响。方法 应用胸腺嘧啶核苷 (TdR )双阻断法将培养的Hela细胞同步化 ,采用MTT法、流式细胞术和荧光染色 ,分析同步化的Hela细胞和正常培养的Hela细胞对TNF(加放线菌酮增效 )诱导凋亡的敏感性。结果 同步化Hela细胞较正常培养的Hela细胞对TNF诱导凋亡的敏感性增强。

芦荟多糖对小鼠腹腔巨噬细胞NO生成和iNOS酶活性的影响

目的探讨芦荟多糖(AloePolysaccharides,AP)对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(nitricox-ide,NO)生成和诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)酶活性的影响。方法体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,分别用0～400mg/L浓度的AP刺激24h,采用Griess反应测定NO生成量,荧光法检测iNOS活性。结果AP在25～400mg/L浓度范围内作用于小鼠腹腔巨噬细胞24h后,NO生成量增加、iNOS活性增高,除低浓度AP组(25mg/L)外,其余各浓度组差别均具有非常显著性意义(P<0.01),并呈显著正相关(r=0.7523,P<0.01);转录抑制剂放线菌素D、蛋白质合成抑制剂放线菌酮和NOS竞争性抑制剂L-NMA,均能有效抑制AP所诱导的巨噬细胞NO生成和细胞内iNOS活性(P<0.01)。结论AP能促进细胞内iNOS基因表达,以从头合成方式促进细胞NO合成和释放,所释放的NO可能参与AP的免疫调节过程。

三种天然抗氧化剂对早幼粒白血病细胞（HL－60）的生长抑制作用研究

用不同终浓度的茶多酚、丹酚酸Ｂ和知母宁进行ＭＴＴ实验，观察这三种天然抗氧化剂对ＨＬ一６０细胞存活和增殖的影响。实验结果表明，三种天然抗氧化剂在５～８０μｇ／ｍｌ浓度范围内均对ＨＬ一６０细胞生长和增殖有抑制作用，并呈明显的剂量依赖关系。茶多酚半抑制浓度（ＩＣ５０）为１７。７μｇ／ｍｌ，丹酚酸ＢＩＣ５０为２２．５μｇ／ｍｌ，知母宁ＩＣ５０为１７．１μｇ／ｍｌ。推测它们对ＨＬ一６０细胞生长的抑制作用可能与其抗氧化性质和清除自由基、活性氧效能有关。

印度与中国医学教育的比较刍论

印度和中国同样是发展中国家,相似点极多,都存在基础设施差、医学教育与其它教育发展不平衡等问题。但印度医学教育以其独有的特色、灵活性、实用性和可操作性发展着医学精英教育,很多地方值得我们借鉴。

槲皮素对Hela细胞细胞周期和RNA聚合酶活性的影响

目的 :观察槲皮素对 Hela细胞细胞周期和 RNA聚合酶活性的影响及其相互关系。方法 :分别用 4、2 0和 10 0 μmol/ L 槲皮素处理培养的 Hela细胞 3d后 ,应用流式细胞仪进行细胞周期分析 ,并通过体外核转录实验测定总 RNA聚合酶活性和 RNA聚合酶 活性。结果 :Hela细胞经槲皮素处理后 ,细胞周期中 G1 期细胞增加并呈现量 -效关系 ,显示槲皮素有阻断 Hela细胞周期于 G1 期作用 ;总 RNA聚合酶活性和 RNA聚合酶 活性均受抑制 ,并呈现量 -效关系。结论 :槲皮素阻断 Hela细胞周期于 G1 期与抑制 RNA聚合酶活性有关。

端粒保护蛋白过表达对HeLa细胞染色体端-端融合和端粒酶活性的影响

目的观察人端粒保护蛋白1(human protection of telom eres 1,hPOT1)基因过表达对HeLa细胞染色体端-端融合和端粒酶活性的影响。方法利用先前构建的hPOT1基因真核表达重组质粒pcDNA3-hPOT1,经脂质体介导瞬时转染HeLa细胞介导hPOT1基因过表达;秋水仙碱阻滞细胞周期于分裂中期,DAPI荧光染色分析染色体端-端融合;Telom erase PCR-ELISA试剂盒检测端粒酶活性。结果pcDNA3-hPOT1重组质粒转染HeLa细胞5 d后,染色体端-端融合几率增加,对端粒酶活性无明显影响。结论提示hPOT1蛋白可导致染色体端-端融合。

细胞周期对肿瘤坏死因子诱导Hela细胞凋亡的影响

目的 研究细胞周期对肿瘤坏死因子 ( TNF)诱导 Hela细胞凋亡的影响。方法 通过胸腺嘧啶核苷酸 ( Td R)阻断法阻滞 Hela细胞的细胞周期 ,以 MTT法、流式细胞术和荧光染色分析 Td R阻滞细胞和周期化的 Hela细胞对 TNF诱导凋亡的敏感性。结果 Td R阻滞细胞周期较周期化的 Hela细胞对 TNF诱导的凋亡的敏感性降低。结论 揭示 TNF诱导

培养的人癌细胞株(系)pot1基因exon12突变筛选

目的对培养的人癌细胞株(系)中pot1(protectionoftelomeres1)基因exon12进行突变筛选。方法从27株培养的人癌细胞株(系)提取染色体组DNA,用PCR方法扩增hpot1基因exon12,PCR产物纯化后直接测序,测序结果与GenBank和NCBI数据库中pot1基因的数据比较,对培养的人癌细胞株(系)中hpot1基因exon12进行突变分析。结果测序结果显示,人宫颈癌Hela细胞株和人卵巢癌细胞株(高转移)HO8910-PM等5个来源于女性生殖系统癌细胞株中的4个,在hpot1基因exon12区有相同的置换突变(G17722→C),为错义突变,对应于cDNA的G1385→C,多肽链的Leu454→Phe;而其余23个不同来源的癌细胞株(系)均无突变。结论提示hpot1基因exon12(17722碱基)是突变热点区,并且这种突变可能具有女性生殖系统肿瘤特异性。

TNF-α信号传导通路的分子机理

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)是一种具有多效生物学效应的细胞因子.TNF的生物学效应都是通过细胞表面的2种TNF受体(TNFR)引发,其信号传导通路主要包括caspase家族介导的细胞凋亡、衔接蛋白TRAF介导的转录因子NF-κB和JNK蛋白激酶的活化.TNFR1和TNFR2的生物学功能不是独立的,许多生物学活性由二者共同完成.3条信号传导通路之间及各通路内部含有各种调节机制,使TNF的各种生物学功能协调发挥出来.本文评述了3条信号传导通路最新进展、关键激酶的研究状况及其在整个信号网络中的作用机理,如IKK的激活以及重要的信号转导分子RIP、TRAF2、TRUSS的结构、相互作用的方式等.

酵母多糖对小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮和白细胞介素-1的影响

目的探讨酵母多糖对小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮 (NO)和白细胞介素 1(IL 1)的影响。方法将不同剂量的酵母多糖加入体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中 ,取细胞培养上清液根据Griess反应检测NO-2 的量 ,间接反映巨噬细胞产生NO的生成量 ,并用溴化四唑蓝 (MTT)比色法检测上清液中IL 1的生成量。结果酵母多糖可明显促进小鼠腹腔巨细胞产生NO和IL 1,NO的生成量呈现剂量依赖关系。结论酵母多糖可诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生NO和IL 1,可能是酵母多糖调节机体免疫功能。

白藜芦醇诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡的线粒体机制(英文)

目的 探讨白藜芦醇诱导鼻咽癌细胞CNE 2Z凋亡的线粒体机制。方法 用 10 0 μmol·L- 1白藜芦醇分别处理细胞 0 (对照 ) ,2 ,4 ,8,12 ,2 4h和分别用 0 ,2 5 ,5 0 ,10 0 ,2 0 0 μmol·L- 1白藜芦醇处理CNE 2Z细胞 8h ,采用Western印迹分析Bcl 2 ,Bax和胞浆中细胞色素C(CytC)的蛋白水平变化 ,罗丹明 12 3荧光染色后经流式细胞术检测线粒体膜电位(△ψm)变化 ,比色法测定半胱天冬酶 9的活性改变。结果 ① 10 0 μmol·L- 1白藜芦醇处理细胞不同时间 ,Bcl 2蛋白表达和△ψm 减少、胞浆中的CytC和半胱天冬酶 9活性增高均呈时间依赖性 (P <0 .0 1) ,但Bax蛋白表达无改变。除Bax以外的其他指标均自白藜芦醇处理 2h即有变化。Bcl 2的蛋白表达受抑和△ψm 的丧失在 4～ 8h间最明显 (与对照组比较P <0 .0 1) ,在 2 4h时已无意义。胞浆中CytC水平和半胱天冬酶 9活性在 8h达高峰 (分别为 0h的 3.0 ,5 .4倍 ) ,2 4h时仍明显高于对照组(P <0 .0 1)。②细胞经不同浓度的白藜芦醇处理 8h后 ,Bcl 2的蛋白表达受抑、△ψm 的丧失、CytC的释放和半胱天冬酶 9活性的升高均具有剂量依赖性 (P <0 .0 1) ,但Bax的蛋白表达未受影响。结论白藜芦醇可能经一个线粒体 /半胱天冬酶 9的特定途径诱导CNE 2Z细胞凋亡 ,但此凋亡?

翡翠贻贝提取物对小鼠抗疲劳作用的研究

为探讨翡翠贻贝提取物对小鼠的抗疲劳作用,采用不同浓度翡翠贻贝提取物(EME)溶液作为饮用水喂养实验小鼠,然后测定小鼠负重游泳时间、血尿素氮(BUN)和肝糖原等指标。结果显示,20g/L的EME即可明显延长小鼠负重游泳时间,降低小鼠血清尿素氮,提高小鼠肝糖原水平,表明翡翠贻贝提取物对小鼠有抗疲劳作用。

心血管疾病患者血清NO与SOD、LPO水平变化及其相互关系的研究

对23例原发性高血压（EH）、36例冠心病（CHD）和30例健康人血清NO、SOD和LPO其中CHD组包括15例急性心肌梗塞（AMI）和21例非梗塞性CHD水平的测定．结果表明，EH组血清NO水平较健康对照组显著降低（P＜0.01），而SOD活性无显著性差异；在CHD组中，与健康对照组比较，NO和SOD水平均显著降低（P＜0．01），其中，非梗塞性CHD组的NO和SOD水平也均显著降低（P＜0.01），AMI组与对照组间均无显著性差异（P＜0．01）；另外，AMI组较非梗塞组SOD活住显著位增高（P＜0.01），NO水平虽有增高但无显著性意义；所有各患者组血清LPO均显著高于健康对照组（P＜0．01）．结果提示，在心血管疾病发生发展过程中，NO与氧自由基之间存在着相互关系。